水蛭素对阿霉素肾病、肾硬化大鼠模型TGF-β1影响的实验研究

摘要

目的：
　　1.建立大鼠阿霉素肾病、肾硬化动物模型，应用水蛭素(脉血康肠溶胶囊)来治疗大鼠阿霉素肾病、肾硬化，观察其疗效，评价其对肾病、肾硬化病理进展过程的作用，以期发现对肾病、肾硬化有治疗作用的中成药物，
　　2.探讨水蛭素治疗肾病、肾硬化的作用机理，从而更好地指导临床上对肾病、肾硬化的治疗。
　　材料与方法：
　　将用阿霉素诱导形成肾病、肾硬化的Wistar大鼠50只，进行随机分组，分为正常对照A组(10只)、肾病对照B组(10只)、肾硬化对照C组(10只)、肾病水蛭素治疗组D组(10只)、肾硬化水蛭素治疗E组(10只)。观测各组大鼠血生化:尿蛋白、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、血脂(TG、CHO)及尿液分析:尿蛋白定性的变化，共监测5次，分别为模型制造前、第一次尾静脉注射阿霉素2周后、第二次尾静脉注射阿霉素2周后、水蛭素灌胃治疗前、4周灌胃实验结束后。模型制造成功后，给予水蛭素灌胃治疗，疗程4周，之后将各组大鼠麻醉10％福尔马林体循环灌注处死，留取双侧肾脏标本，常规方法进行组织脱水、石蜡包埋及切片，并进行HE法染色，光境下观察肾组织中肾小球硬化、肾小管损伤及其它病理性损害的改变及其程度，并用免疫组化(SP法)观察肾脏组织内转化生长因子β1(TGF-β1)的分布及表达。通过上述指标来评估水蛭素药物对肾病、肾硬化的治疗效果。
　　结果：
　　1.尿蛋白定性方面
　　第一次尾静脉注射阿霉素后，B、C、D、E组均出现蛋白尿，第二次注射后C、E组蛋白量明显较较第一次注射后增多。水蛭素治疗4周后，D与B组、E组与C组蛋白定性可见明显减少。
　　2.血生化方面
　　B、C、D、E组在第一次尾静脉注射阿霉素2周后血总蛋白、白蛋白均出现不同程度的降低及血总胆固醇、甘油三酯的升高，第二次注射后C、E组低蛋白血症、高脂血症加重并出现轻度肾功能的损害血肌酐、尿素氮出现增高。经水蛭素干预治疗后，D组与B组相比血总胆固醇及甘油三酯可见明显降低，血白蛋白及总蛋白有所回升，E组与D组比较除上述相同结果外，血肌酐、尿素也稍有降低。
　　3.肾组织HE染色病理方面
　　A组:大鼠肾脏外观大小正常，质韧，表面光滑，肾皮质、髓质结构分界清晰，肾小球毛细血管壁未见增厚，血管绊未见闭塞，未见球囊粘连，未见系膜细胞、细胞外基质增生。各级肾小管及集合管结构可，肾小管上皮细胞未见空泡变性、脂滴样变性、颗粒样变性、玻璃样变性或坏死，肾小管及集合管未见扩张、萎缩，管腔内未见管型，间质未见血管扩张、充血、炎症细胞浸润，小球、小管周围及间质未见纤维增生。
　　B组:外观苍白，体积肿大，质韧，切面肾皮质与肾髓质结构欠清晰，系膜外基质轻度增生，肾小管上皮细胞可见不同程度的颗粒变性、空泡变性，肾小管及集合管腔内可见大量的蛋白管型，肾小管囊性扩张，肾小管问质炎症细胞轻度浸润。
　　C组:大鼠肾脏外观黄，体积缩小，硬韧，表面呈颗粒，切面皮髓分界不清，肾小球系膜细胞、系膜基质增生，肾小球基底膜断裂，有局灶分布的节段性硬化的肾小球，毛细血管节段性绊闭塞，毛细血管袢瘤样扩张，肾小球与肾小囊粘连，球囊壁增厚，肾小球及肾小管周围纤维增生明显、伴有成纤维细胞浸润，肾小管明显萎缩，周围肾小管代偿性片状扩张，肾小管上皮细胞脱落坏死、内皮细胞空泡变性，蛋白管型形成。肾间质重度炎性细胞浸润。
　　D组:外观稍苍白，肿大的体积减轻，切面肾皮质、髓质结构欠清晰，病理变化各方面均较ADR肾病组有所缓解，肾小管及集合管腔内蛋白管型减轻，但仍较多，肾小管间质炎症细胞浸润减轻。
　　E组:外观黄，稍变小。肾小球、肾小管、肾问质病理改变程度较硬化组缓解。
　　4.肾组织免疫组化方面
　　B组可见肾小管阳性表达，肾小球几乎无表达;C组肾小管强阳性表达，肾小球阳性表达;D组肾小管阳性表达，较B组可见减轻;E组肾小球、肾小管阳性表达，与C组相比TGF-β1所形成的棕黄色沉淀物明显减少。
　　结论：
　　1.水蛭素能不同程度降低阿霉素肾病、肾硬化大鼠尿蛋白、血肌酐、尿素氮、血甘油三酯、总胆固醇，升高血总蛋白、白蛋白。
　　2.水蛭素能不同程度减轻阿霉素肾病、肾硬化大鼠的病理改变，降低肾小球硬化系数、肾小管间质损伤分数及肾小球小管TGF-β1的表达。
　　3.水蛭素的上述治疗效果我们认为可能因为它的活血化瘀、抗凝、降低血脂，间接抗炎、抗增殖的作用，同时能降低TGF-β1表达改善肾功能，延缓肾脏损害的进展。

目录

摘要

符号说明

前言

第一部分 动物模型的制作和水蛭素对模型血生化、病理改变的影响

材料与方法

结果

讨论

第二部分 水蛭素对阿霉素肾病、肾硬化大鼠动物模型转化生长因子TGF-β1的影响的研究

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述 水蛭素在肾病、肾小球硬化中的研究进展

致谢

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