蝴蝶兰组培外植体褐化影响因素的研究

摘要

蝴蝶兰(Phalaenopsisspp.)是一种极富观赏价值的名贵花卉，被誉为“洋兰皇后”，组织培养为其主要的繁殖方式。褐化现象在其组培快繁过程中普遍存在，严重影响外植体分化，是制约蝴蝶兰工厂化生产的难题。本研究以蝴蝶兰无菌苗为材料，观察其褐化前后的细胞结构；定性定量分析褐化前后外植体内的酚酸；测定不同处理外植体内PPO活性和总酚含量，以期找到有效降低褐化的方法。主要研究结果如下： 1.光学显微镜观察表明，褐变发生后，蝴蝶兰外植体细胞结构破坏，细胞壁有明显的皱缩，有的地方断裂较明显，细胞中沉积大量的黑色颗粒状物质。 2.利用高效液相色谱仪，对蝴蝶兰组培外植体褐化前后体内的酚酸进行定性定量分析，初步表明绿原酸、邻苯二酚、儿茶酚、咖啡酸是与蝴蝶兰(R4)褐化相关的酚酸，而起主要作用的则可能是邻苯二酚和绿原酸。 3.培养基pH6.5或培养温度20℃时蝴蝶兰外植体褐化率最低。在培养温度(25℃)相同时，PPO活性、总酚含量高低并不与pH值大小成正比，且褐化率与PPO无显著相关性，pH5.0时，褐化率与总酚含量显著相关；在培养基pH(6.0)相同时，温度越高，褐化率越高，PPO活性越强，总酚含量越高，且20℃时，褐化率与PPO、总酚含量分别达到极显著、显著相关，30℃时，褐化率与总酚含量显著相关。 4.10001x和30001x光强下培养的蝴蝶兰外植体褐化较轻，20001x光强培养的外植体褐化严重且PPO活性高于其他两处理，差异显著，三处理中褐化率与PPO活性均无显著相关性；各处理间总酚含量差异不显著，10001x和20001x条件下培养的外植体褐化率与总酚含量显著相关。黑暗预处理能减轻蝴蝶兰组培外植体褐化，其中以预处理10d的褐化最轻；未经暗处理的褐化最重且PPO活性最大，总酚含量无一致变化规律，各处理中褐化率与PPO活性显著相关，预暗培养5天的外植体褐化率与总酚含量显著相关。接种前对外植体遮光处理能有效减轻褐化，以双层膜遮光效果好；各处理中褐化率与PPO活性均无显著相关性，未遮光和双层膜遮光的外植体褐化率与总酚含量显著相关。

目录

文摘

英文文摘

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第一章文献综述

第二章材料与方法

第三章结果与分析

第四章讨论

第五章结论

参考文献

图版及图版说明

缩略词表

致谢

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