呼吸道合胞病毒重组蛋白D9-G126-F/M2的表达及检测

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本文对呼吸道合胞病毒重组蛋白D9-G126-F/M2的表达及检测进行了研究。文章将G蛋白基因100～225的一段与F/M2：81～95片段共同连接进pET-15b(DsbA)表达载体中，于E.coliBL21(DE3)中表达出目的蛋白，经检测目的蛋白是以包涵体形式表达，对目的蛋白进行分离纯化后采用腹腔注射的方法免疫9周龄的雌性BALB/c小鼠，三次加强免疫后采集小鼠的血液、脾、肺。通过蚀斑抑制实验检测肺组织匀浆中的中和抗体滴度；做ELISA实验检测血清中及肺组织匀浆中的抗体滴度；培养P815细胞，分别用RSV和表达出的目的蛋白刺激P815细胞，将其制成靶细胞，分别与不同比例的脾细胞进行作用，利用MTT法检测脾细胞中的CTL活性评价了重组蛋白的细胞免疫水平。

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作者
王云飞;
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作者单位

西北农林科技大学;

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授予单位西北农林科技大学;
学科预防兽医学
授予学位硕士
导师姓名于三科,梅兴国;
年度 2006
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类呼吸道传染性病毒;免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
呼吸道合胞病毒; 重组蛋白; 脾细胞; 实验检测; 肺组织匀浆; 抗体滴度; 免疫水平; 形式表达; 小鼠; 检测血清; 加强免疫; 活性评价; 腹腔注射; 分离纯化; 蛋白基因; 表达载体; 检测目; 包涵体; 靶细胞; 中和;

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