草坪与牧草种质的超低温保存研究

摘要

本文研究了多年生黑麦草愈伤组织超低温冷冻最佳保护剂的筛选，超低温保存时间，草坪与牧草种子含水量、解冻温度对超低温保存效果的影响，草坪与牧草种子超低温保存前后遗传特性的变化。具体结果如下： 1、采用正交试验法筛选超低温保存多年生黑麦草愈伤组织的超低温冷冻保护剂组合，结果表明5％DMSO，15％PEG，30％甘油，15％蔗糖的水溶液保护剂组合效果最好，成活率预估达保存前的95.2％。 2、通过对多年生黑麦草及红豆草种子超低温保存前后种子发芽率，发芽指数，电导率，脱氢酶活性、丙二醛含量和可溶性糖含量的测定分析，研究了超低温保存时间及种子含水量对多年生黑麦草及红豆草种子的影响，结果表明：多年生黑麦草与红豆草种子在自然含水量状态即可直接投入液氮中保存，保存时间的长短对种子影响不显著(p>0.05)；多年生黑麦草种子超低温保存前后差异不显著(p>O.05)，红豆草种子冻后发生了有益的适应性变化；含水量水平并不是影响超低温保存效果的重要因素，多年生黑麦草种子与红豆草种子超低温保存最适合的含水量范围，分别是9.2％～11.8％与5.6％～9.0％。 3、通过对多年生黑麦草、高羊茅、白三叶、红豆草、紫花苜蓿种子超低温保存前后发芽率，发芽指数，电导率的测定分析，研究了解冻温度0℃、25℃、37℃、50℃对种子的影响，结果表明：解冻温度对红豆草，白三叶及高羊茅种子各指标的变化影响不大(0>0.05)，而紫花苜蓿、多年生黑麦草种子最适合的解冻温度分别是37℃、37-50℃。 4、通过对多年生黑麦草、高羊茅、白三叶、红豆草、紫花苜蓿种子超低温保存前后种子过氧化氢酶同工酶谱的测定分析，研究了超低温保存对种子遗传特性的影响，结果表明：多年生黑麦草与高羊茅种子超低温保存前后同工酶谱带没有变化，超低温保存对它们的遗传特性可能没有影响；用与这两种禾本科同样的过氧化氢酶同工酶谱测定方法测定白三叶、红豆草、紫花苜蓿种子，发现其超低温保存前后过氧化氢酶同工酶谱条带都没有出现，具体原因尚不清楚。

目录

文摘

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论文说明：缩略词

声明

第一章综述

1.1超低温保存的基本原理

1.2超低温保存程序及方式

1.2.1材料选择

1.2.2抗寒锻炼或预培养

1.2.3冰冻保护剂(PVS)处理

1.2.4液氮中超低温冷冻

1.2.5解冻

1.2.6材料活力测定或植株再生

1.3国内外研究现状

1.3.1茎尖分生组织

1.3.2花粉

1.3.3悬浮细胞及愈伤组织

1.3.4种子

1.3.5胚、胚轴与体细胞胚

1.3.6其它

1.4前景讨论

第二章选题的目的、意义和依据

2.1目的意义

2.2依据

第三章研究内容及方法

3.1材料

3.2方法

3.2.1超低温保存多年生黑麦草愈伤组织

3.2.2草坪及牧草种子的超低温保存

第四章结果与分析

4.1愈伤组织的超低温保存

4.2草坪及牧草种子的超低温保存

4.2.1保存时间对自然含水量种子超低温保存的影响

4.2.2不同草种超低温保存前后的生理变化及适宜种子含水量

4.2.3解冻温度对草坪与牧草种质超低温保存效果的影响

4.2.4超低温冻存对种子遗传特性的影响

第五章讨论与结论

5.1讨论

5.1.1愈伤组织的超低温保存

5.1.2种子的超低温保存

5.2结论

参考文献

致 谢

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