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秦巴山区野生百合及栽培百合3种病毒病发生的研究

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第一章文献综述

1.1百合及其起源分布

1.2百合的研究应用价值

1.2.1百合的食用和药用价值

1.2.2百合的观赏价值

1.3百合的栽培应用

1.3.1百合的栽培应用历史

1.3.2百合的栽培现状

1.4百合病毒病的危害

1.5主要百合病毒病研究概况

1.5.1侵染百合的LSV研究概况

1.5.2侵染百合的黄瓜花叶病毒

1.5.3侵染百合的LMoV

1.6我国百合病毒病检测技术研究进展

1.7百合抗病毒病研究概况

1.8野生百合方面的研究进展

1.9本研究的目的意义

第二章材料与方法

2.1材料

2.1.1野生百合材料

2.1.2栽培百合材料

2.2仪器和试剂

2.2.1仪器

2.2.2菌种、质粒和试剂

2.3方法

2.3.1发病情况调查

2.3.2 RNA的提取

2.3.3引物的设计与合成

2.3.4 cDNA的合成

2.3.5基因的克隆

2.3.6 PCR产物纯化

2.3.7连接反应

2.3.8感受态细胞的制备

2.3.9转化和筛选

2.3.10重组质粒的鉴定

2.3.11序列测定与同源性分析

2.3.12百合属植物抗病性综合评价

第三章结果与分析

3.1野生百合病毒病发生情况调查

3.1.1病毒病发病情况统计

3.1.2病毒的检测

3.1.3野生百合自然条件下抗病性综合评价结果

3.2栽培百合病毒病发生状况

3.2.1栽培百合病毒病发病情况统计

3.2.2病毒的检测

3.2.3福建Siberlia病毒病检测

第四章讨论

4.1野生百合病毒病发生讨论

4.1.1病毒病发生的影响因素

4.1.2野生百合病毒的种类鉴定

4.1.3野生百合的抗病毒特性对育种的指导作用

4.2栽培百合病毒病发生讨论

4.2.1新铁炮百合的发病情况

4.2.2 Siberia病毒病发生讨论

4.2.3栽培百合引种与病毒病发生的关系

第五章结论

5.1野生百合病毒病发生情况

5.2栽培百合病毒病发生情况

5.3栽培条件对百合病毒病发生的影响

参考文献

附 录

致 谢

作者简介

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摘要

本研究以采自秦巴山区的6种野生百合(宜昌百合(Lilium.leucanthum)、山丹(Lilium.pumilum)、野百合(Lilium.brownii),大花卷丹(Lilium.leichtlinii var.maximowiczii)、岷江百合(Lilium.Regale)和卷丹(Lilium.tigrinum))和来自国内外不同地方的3种不同百合杂交系17个品种的栽培百合(凝视星空‘Stargazer’、西伯利亚‘Siberia’、伯尼尼‘Bernini’、索德尔‘Soldera.’、基辅‘Kiev’、泰伯‘Tiber’、索邦‘Sorbonne’、木门‘Corl、dool’、曼丽莎‘Manissa’、多安娜‘Boliana’、普瑞特‘Prato’、Corvara、隆巴蒂‘Lombardia’、莫杜萨‘Medusa’、康伽德奥‘ConcaD'or’、耶罗林(黄天霸)‘Yelloween’、新铁炮‘Longiflorum×Asian’)为材料,针对目前世界百合产业中发生范围最广的3种病毒病(黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaicvirus,CMV)、百合斑驳病毒(Lily mottle virus,LMOV)和百合无症病毒(Lily syptomlessvirus,LSV))进行田间发病情况调查和病毒病RT-PCR分子检测,旨在搞清野生百合和栽培百合在原生长地是否携带病毒,携带哪种病毒;异地栽培整个生长过程中野生百合和栽培百合是否有病毒病发生,危害程度轻重以及受何种病毒危害;病毒病在不同种或品种上的发生是否有差异,通过田间发病程度初步判断出各种或品种的抗病毒特性,为百合资源的保存利用免受病毒侵害提供依据,并为抗病毒育种的深入研究奠定基础。经调查及检测,获得如下结果: 1.经初期调查鉴定,在收集的6种野生百合中,除卷丹以外,另外的5种百合均可确定在原生地不携带普遍发生的3种病毒,卷丹已在本地栽培一年,故不能确定其所带病毒是否在原生地就有发生;在引种的17种栽培百合中,新铁炮百合是唯一1种引种时便已携带病毒的品种,携带病毒种类为百合斑驳病毒LMoV,另外16种均不携带病毒。 2.各个种及品种在整个生长过程中,大田栽培的野生种除岷江百合外,其余5种均不同程度表现出花叶、斑驳等病毒病症状,且发病率和病情指数均很高;温室种植的栽培品种只有新铁炮百合感染病毒,且在生长过程中扩散程度较轻,发病率从66.5%增至71.3%,而其他品种均无病毒病发生。另外,福建收集的西伯利亚表现花叶扭曲等病毒病症状,发病程度较严重。 3.各野生种在其生长过程中携带病毒种类有差别,岷江百合无病毒侵染,卷丹感染百合斑驳病毒,野百合、大花卷丹、山丹和宜昌百合均被黄瓜花叶病毒和百合斑驳病毒复合侵染。不同种野生百合的抗病毒特性不同,岷江百合对病毒病的综合抗性最强,抗病程度为免疫;大花卷丹和宜昌百合,属中感类型:山丹、卷丹和野百合对病毒病抗性为高感类型。 而栽培百合中,新铁炮百合在生长期间未感染其他病毒,只携带LMoV一种病毒。福建收集的西伯利亚被3种病毒复合侵染。因栽培百合品种生长过程中多数品种不带病毒,因而未进行抗性对比。

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