围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊糖脂代谢的影响及其机制

摘要

羔羊培育是奶山羊养殖过程的重要环节，羔羊阶段打下良好基础对于成年后奶山羊的生产性能十分关键。子代代谢易受母体营养干预的影响，烟酰胺可调控糖脂代谢，但缺乏母体添加烟酰胺对子代糖脂代谢影响的研究，基于以上，提出本试验假设：围产期奶山羊添加烟酰胺通过调控羔羊机体 PGC1α 通路影响糖脂代谢，最终调节羔羊生长发育。本试验从母体添加烟酰胺入手，研究烟酰胺的母体营养干预对羔羊糖脂代谢及肠道形态发育的影响及其机制，为羔羊生长发育的营养调控研究提供理论依据。 试验一 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊肠道形态发育及养分转运载体表达的影响 本试验选取15只围产期奶山羊（产前21 d），按配对设计原则分为3组，分别为对照组（C组）、产后1~28 d添加烟酰胺组（P组）和产前21 d至产后28 d添加烟酰胺组（EP组），所产羔羊分别为LC组、LP组和LEP组，人工定量哺喂对应组母乳。羔羊28日龄屠宰，取出十二指肠、空肠和回肠进行肠道形态分析。结果显示，LP和LEP组十二指肠绒毛高度显著高于LC组（P＜0.05），绒毛高度与隐窝深度比值（V/C）极显著高于LC组（P<0.01）；空肠绒毛高度各组间无显著差异（P＞0.05），LP组和LEP组空肠V/C比值显著高于LC组（P＜0.05）；LEP组回肠绒毛高度显著高于LC和LP组（P＜0.05）， V/C比值极显著高于LC和LP组（P<0.01）。十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度各组间差异均不显著（P＞0.05）。 用 RT-qPCR 方法检测各肠道黏膜中葡萄糖转运载体的表达，结果显示十二指肠葡萄糖转运载体2（GLUT2）和Na依赖的葡萄糖转运载体（SGLT1）的相对表达水平各组间无显著差异（P＞0.05）；LP组羔羊空肠的GLUT2相对表达水平极显著高于LC组和LEP组（P < 0.01），LP组和LEP组羔羊空肠的SGLT1的相对表达水平极显著高于LC组（P<0.01）；LEP组羔羊回肠的GLUT2相对表达水平显著高于LC和LP组（P＜0.05）， LP组和LEP组羔羊回肠SGLT1相对表达水平极显著低于LC组（P<0.01）。本试验结果表明：围产期奶山羊添加烟酰胺可促进羔羊小肠形态发育，提高空肠葡萄糖转运载体GLUT2、SGLT1的表达和回肠GLUT2的表达，促进空肠和回肠葡萄糖的吸收。 试验二 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊糖代谢和血液生化指标的影响 羔羊14日龄和28日龄颈静脉采血，测定血液生化指标；于28日龄时屠宰，采集肝脏组织进行糖代谢指标的测定。结果显示羔羊 14 日龄，LP和 LEP组血浆葡萄糖含量和血浆尿素氮（PUN）含量极显著高于LC组（P<0.01），血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平显著低于LC组（P < 0.05）；血浆甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、极低密度脂蛋白（VLDL）、谷草转氨酶（GOT）和谷丙转氨酶（GPT）含量组间差异不显著（P > 0.05）；羔羊28日龄时，LEP组PUN含量显著高于LC组（P＜0.05），TG含量极显著高于LC组与LP组（P<0.01）；LP和LEP组血浆GPT含量极显著低于LC组（P<0.01），脂肪酶活性极显著高于LC组（P<0.01）。 LEP组肝脏糖原含量具有低于LC组和LP组的趋势（P=0.062）。用RT-qPCR技术检测肝脏组织糖代谢关键基因及转录因子的mRNA表达水平，结果显示LP和LEP组磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCK）相对表达水平极显著低于LC组（P < 0.01），肝脏糖原合成酶（GS）、GLUT2、叉头转录因子 1（FoxO1）和过氧化物酶体增殖物激活受体 γ共激活剂α（PGC1α）的相对表达水平均显著低于LC组（P＜0.05）。本试验结果表明：围产期奶山羊添加烟酰胺抑制羔羊肝脏糖异生和糖原合成。 试验三 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊脂肪代谢的影响及机制 采集28日龄羔羊的肝脏组织和腹腔脂肪组织，检测肝脏和腹脂中的表观生化指标，结果显示LP和LEP组肝脏FFA含量显著高于LC组（P＜0.05），腹脂TG含量极显著高于LC组（P<0.01）。LEP组羔羊腹脂FFA含量显著高于LC组（P＜0.05），TG含量极显著高于LP组（P<0.01）。 用RT-qPCR方法检测肝脏和腹脂中脂肪代谢关键基因的mRNA表达，结果显示LEP组羔羊肝脏脂肪酸合酶（FAS）和载脂蛋白 B（ApoB）的相对表达水平显著低于 LC组（P < 0.05），微粒体三酰甘油转移蛋白（MTTP）相对表达水平极显著高于LC和LP组（P<0.01），LP组激素敏感脂酶（HSL）相对表达水平显著低于LC组（P＜0.05）。LEP组羔羊腹脂FAS相对表达水平显著高于LC和LP组（P＜0.05），腹脂甘油-3磷酸酰基转移酶（GPAM）相对表达水平极显著高于LC组和LP组（P < 0.01），LP和LEP组磷酸甘油酰基转移酶6（AGPAT6）相对表达水平极显著高于LC组（P<0.01）。 用酶联免疫分析（ELISA）试剂盒检测肝脏和腹脂中脂肪代谢关键酶酶活性，结果显示LEP组羔羊肝脏AGPAT6活性显著低于LC和LP组（P＜0.05），LP组HSL活性显著高于LC组（P < 0.05）。本试验结果表明：围产期奶山羊添加烟酰胺促进羔羊肝脏脂肪分解，并促进羔羊腹脂沉积。 综上所述，围产期奶山羊添加烟酰胺提高羔羊肠道对葡萄糖吸收，抑制羔羊肝脏糖异生，促进肝脏脂肪分解；也可促进羔羊腹脂脂肪沉积和小肠形态发育，促进羔羊生长发育。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 奶畜围产期营养对子代生长发育的影响

1.2 烟酰胺的生理功能

1.3 烟酰胺的来源及吸收代谢

1.4 烟酰胺对糖代谢的影响

1.5 烟酰胺对脂肪代谢的影响

1.6 烟酰胺对肠道发育的影响

1.7 烟酰胺的母体效应

1.8研究内容及技术路线

第二章 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊肠道形态发育和养分转运载体表达的影响

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

2.4 小结

第三章 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊糖代谢和血液生化指标的影响

3.1 材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 小结

第四章 围产期奶山羊添加烟酰胺对羔羊脂肪代谢的影响及机制

4.1 材料与方法

4.2 结果

4.3 讨论

4.4 小结

第五章 全文总结与建议

5.1 本研究主要结论

5.2 待进一步解决问题

参考文献

附录

致谢

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