戊二醛聚合猪血红蛋白在术中急性贫血状态下有效性研究

摘要

贫血是临床最常见的表现之一，症状的轻重与贫血发生的程度及进展速度有关，急性重度贫血可导致组织缺氧性损伤甚至死亡，输入血液或血液制品是临床治疗急性贫血的主要方法。但由于血液感染风险、血液短缺、血液误输以及保存方式等因素，寻求合适的血液替代品成为必然趋势。血红蛋白氧载体(Hemoglobin-based oxygen carriers，HBOCs)是以血红蛋白为基础的一类能够代替血液部分功能的化合物。戊二醛聚合猪血红蛋白(polymerized porcine hemoglobin，pPolyHb)是由戊二醛交联聚合猪血红蛋白制备的一种新型的HBOCs，其前期在失血性休克、100％换血等动物模型中，从血流动力学，酸碱代谢，氧供等多方面证明该产品具有良好的扩容及携氧释氧能力，可以保证实验动物正常组织灌注及血流动力学稳定，可有效替代红细胞发挥作用。本实验通过探讨pPolyHb在大鼠和犬急性贫血模型中的复苏效果及其对肝肾等组织的影响进一步证明pPolyHb的有效性。
　　首先探讨pPolyHb在大鼠急性贫血/治疗中对机体血压及动脉血气指标、肝肾损伤因子以及不同液体复苏组织病理损伤情况。建立大鼠等容血液稀释模型，将大鼠血红蛋白含量稀释至4±0.5g/dl或5±0.5g/dl，模拟临床术中贫血，稀释后，通过静脉以0.3mL/min速率输入pPolyHb或红细胞(RBC)，至血红蛋白含量大于7g/dl，control组不进行复苏;监控血压和动脉血气指标，术后7d检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)等肝肾损伤因子含量，处死解剖后通过肾组织HE染色检测病理变化;pPolyHb组和RBC组复苏后血压能够恢复到基础水平，同对照组相比，复苏后pPolyHb组无氧代谢得到显著性改善，有效的纠正了组织酸中毒现象，与红细胞组复苏效果类似，pPolyHb组肝肾损伤因子及肾脏病理组织HE染色结果与sham组没有显著性差异，并优于红细胞组;以上结果表明pPolyHb可以改善大鼠血流动力学参数，减轻代谢性酸中毒，并且可以降低肝肾损伤因子的活性，其治疗效果与RBC相当，显著地优于control组。
　　在犬等容血液稀释模型中，用同样的方法模拟急性贫血状态，研究RBC不可获得的情况下pPolyHb的作用效果。血液稀释后犬随机分为两组，实验组输入3g/kg pPolyHb，对照组以肺动脉楔压(PAWP)为参照，输入生理盐水;监测实验过程中血流动力学参数、血气指标、氧供氧耗参数和凝血状态，术后7d检测血清中肝肾损伤因子含量，解剖后观察肝、肾组织HE染色结果;pPolyHb在无RBC制品情况下使用对血流动力学稳定的维持较晶体液有一定优势，对组织的氧供有一定改善，并且可以降低肝肾损伤因子的活性，在7天后未造成明显特异性的组织损伤。实验表明pPolyHb能够显著的改善犬由于等容血液稀释引起的急性贫血状态。

目录

声明

摘要

缩略语对照表

第一章 文献综述

1．1 术中急性贫血及输血

1．2 血液代用品简介及发展

1．2．1 脂质体包封血红蛋白(liposome encapsulated hemoglobin，LEH)

1．2．2 氟碳化合物(Perfluorocarbons，PFCs)

1．2．3 血红蛋白氧载体(Hemoglobin-based oxygen carriers，HBOCs)

1．3 血清中肝损伤相关因子的介绍

1．4 血清中肾损伤相关因子的介绍

1．5 血栓弹力图(thromboela-stogram，TEG)简介

1．6 本文的研究目的及意义

第二章 pPolyHb对大鼠等容血液稀释复苏的影响

2．1 引言

2．2 实验材料与仪器

2．2．2 主要试剂

2．2．3 仪器设备

2．3 实验方法

2．3．1 大鼠等容血液稀释模型(4±0．5 g／dl)的建立

2．3．2 大鼠等容血液稀释模型(5±0．5 g／dl)的建立

2．4 实验结果与分析

2．4．1 大鼠等容血液稀释模型(4±0．5 g／dl)

2．4．2 大鼠等容血液稀释模型(5±0．5 g／dl)

2．5 讨论

第三章 pPolyHb对犬等容血液稀释复苏的影响

3．1 引言

3．2 实验材料与仪器

3．2．1 实验动物

3．2．2 主要试剂

3．2．3 仪器设备

3．2．4 其它实验耗材

3．3 实验方法

3．3．1 犬等容血液稀释模型的建立

3．3．2 实验方案及分组

3．3．3 术中补救措施

3．3．4 血流动力学参数的测定

3．3．5 动脉血气指标的检测

3．3．7 血栓弹力图(Thrombelastograghy，TEG)检查

3．3．8 血清肝肾损伤因子的检测

3．3．9 组织病理切片的制作

3．3．10 数据处理

3．4 实验结果与分析

3．4．1 生命体征的变化

3．4．2 血管阻力的变化

3．4．3 血气指标

3．4．4 氧供氧耗指标

3．4．5 急性贫血对凝血功能的影响

3．4．6 肾脏、肝脏损伤标志物含量的变化

3．4．7 组织干湿重和病理切片HE染色结果

3．5 讨论

结论

参考文献

致谢