高速逆流色谱分离制备甘草抗血管生成活性成分的研究

摘要

血管生成对肿瘤的生长、转移起到关键作用。以血管生成为靶点的抗肿瘤策略是抗肿瘤领域的研究热点,目前已经发现许多天然和化学合成的抗血管生成药物。甘草(Licorice)是豆科甘草属(Glycyrrhiza)植物的根和根茎,是世界上常用的中药之一。已有研究发现甘草有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种活性,但其抑制血管生成的作用和机制尚不明确。本研究采用斑马鱼抗血管生成模型对甘草提取物进行筛选,利用高速逆流色谱对甘草中的抗血管生成活性成分进行追踪分离和结构鉴定。
　　 首先将甘草的70％乙醇提取物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到4部分。然后将这些部分利用斑马鱼抗血管生成筛选模型进行活性筛分,结果表明乙酸乙酯部分有较好的药理活性。
　　 采用聚酰胺柱色谱将甘草乙酸乙酯部位进一步分成Fr1～Fr7七个部分,斑马鱼抗血管生成模型检测表明,Fr5和Fr6有较好的药理活性。
　　 利用高速逆流色谱对Fr5和Fr6中的化学成分进行分离,从中得到12个单体成分,鉴定了其中的5个化合物,分别为异甘草素、异甘草黄酮醇、licocoumarone、glyurallin A、glyurallin B。利用高速逆流色谱对Fr1～Fr4的化学成分进行分离,从中得到8个单体成分,鉴定了其中的5个化合物,分别为:甘草苷、芒柄花苷、异甘草苷、甘草素、芒柄花素。
　　 利用斑马鱼抗血管生成筛选模型对Fr5和Fr6中的化学成分进行检测,结果表明异甘草素和异甘草黄酮醇有较好的抑制肿瘤血管生成活性,浓度在10ug/mL时对血管的抑制率为100％。