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利用组织培养技术提高杜仲胶产量

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1绪论

2材料与方法

3结果与分析

4讨论

5结论与展望

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摘要

杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)既是名贵的中药材,又是重要的胶源植物。杜仲胶以其特有的高绝缘性、高强度、耐酸碱、防老化和形状记忆性等特点,被广泛应用于许多领域。但是由于杜仲树生长缓慢,且主要提胶原料杜仲叶的含胶量低,使杜仲胶的工业化生产受得了限制。如果采用植物组织和细胞培养技术,在组织和细胞水平上促进杜仲胶的合成,就可以在不受田间条件制约的情况下进行杜仲胶的快速大量生产。为此,本文提出了利用组织培养技术提高杜仲胶产量的研究课题。 本文首先利用杜仲种子进行杜仲无菌苗培养,试验发现,杜仲种子的最适发芽温度为20℃,另外,采用去掉部分胚乳发芽法可以使发芽率提高到94%。 以无菌苗的幼茎、叶片及子叶等为外植体,诱导产生愈伤组织,并对植物生长调节剂、培养基、光照时间、培养温度等对愈伤组织生长的影响进行研究,同时建立愈伤组织体系。结果表明:采用MS培养基并且附加2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA有利于愈伤组织的诱导。B5培养基上附加1.0mg/LNAA+1.5mg/L6-BA,同时控制培养基pH值6.5、光照时间12h/d、培养温度25±2℃,有利于愈伤组织的生长。 在杜仲的组织培养中,愈伤组织中杜仲胶的含量与愈伤组织的生长周期、继代培养次数、培养基中前体乙酸的浓度等都有密切关系。愈伤组织接种到培养基上以后,其杜仲胶含量首先略有下降而后又迅速上升,接种第20天后,愈伤组织中杜仲胶的积累基本趋于稳定。另外,愈伤组织的含胶量随着继代次数的增加呈逐渐增多的趋势,第5代~第8代处于一个含胶量的高峰值,之后又迅速下降。乙酸的添加能提高愈伤组织中杜仲胶的含量,且随着培养基中乙酸浓度的升高,含胶量呈升高的趋势,但同时又会影响愈伤组织的生长。培养基的最适乙酸浓度为1.0mmol/L,此时愈伤组织中的杜仲胶含量为7.59%,愈伤组织的增长率为2255.26%。 通过对杜仲不同组织中含胶细胞的显微观察发现,杜仲含胶细胞是一种细长的、两端略膨大的、丝状分泌单细胞,其横切面形状多样。在当年生的生的杜仲幼茎中,含胶细胞主要分布于初生韧皮部并靠近形成层的部位。此外光照有利于含胶细胞内硬性橡胶颗粒的积累。

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