壳聚糖硒的制备及生物学活性的研究

摘要

本研究工作分为三个试验： 试验一，壳聚糖硒的制备及理化性质测定。选择脱乙酰基度分别为95％、90％、85％的三种食品级壳聚糖，pH值3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0，搅拌时间2h、4h、6h、8h、10h、12h，亚硒酸钠溶液浓度0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0g/mL，研究壳聚糖的不同脱乙酰基度、pH、搅拌时间、亚硒酸钠溶液浓度对壳聚糖硒产品的硒含量及得率的影响。结果显示，脱乙酰基度为85％的壳聚糖在pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0条件下制备的壳聚糖硒的硒含量分别可达4.08 mg/g、4.61mg/g、51.29 mg/g、3.93 mg/g、3.14 mg/g、3.04mg/g，得率为1.96％、2.23％、30.86％、1.85％、1.48％、1.41％；脱乙酰基度为85％的壳聚糖制备的壳聚糖硒的硒含量及得率显著高于脱乙酰基度90％、95％的壳聚糖制备的壳聚糖硒(P<0.05)。在搅拌时间2h、4h、6h、8h、10h、12h条件下制备的壳聚糖硒的硒含量分别可达27.13 mg/g、39.16 mg/g、42.68 mg/g、51.48 mg/g、52.47 mg/g、52.44 mg/g，得率为14.89％、21.68％、23.73％、28.98％、29.47％、29.43％；搅拌时间8h与搅拌时间2h、4h、6h相比壳聚糖硒产品的硒含量及得率差异显著(P<0.05)，与搅拌时间10h、12h相比壳聚糖硒产品的硒含量及得率差异不显著(P>0.05)。亚硒酸钠溶液浓度为0.1g/mL、0.2g/mL、0.4g/mL、0.8g/mL、1.0g/mL、2.0g/mL条件下制备的壳聚糖硒的硒含量分别可达25.48 mg/g、37.36 mg/g、48.84 mg/g、49.19 mg/g、49.61 mg/g、50.04 mg/g，得率为14.05％、21.03％、27.31％、27.55％、27.81％、28.15％；亚硒酸钠溶液浓度0.4g/mL与亚硒酸钠溶液浓度0.1g/mL、0.2g/mL相比制备的壳聚糖硒产品的硒含量及得率差异显著(P<0.05)，与亚硒酸钠溶液浓度0.8g/mL、1.0g/mL、2.0g/mL相比壳聚糖硒的硒含量及得率差异不显著(P>0.05)。 试验表明，壳聚糖与亚硒酸钠配合的最佳条件为pH 5.0、反应时间8h、亚硒酸钠浓度0.4g/mL、壳聚糖的脱乙酰基度85％。 试验二，壳聚糖硒的小鼠急性毒性试验。选择健康昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5个剂量组，分别一次性灌胃壳聚糖硒150、188.93,238.07、299.92、377.83mg/kg·bw，利用孙氏改良寇氏法计算半数致死量(LD<,50>)，研究壳聚糖硒对小白鼠的急性毒性。 结果显示，壳聚糖硒的小鼠经口半数致死量为227.30mg/kg·bw，以硒计为11.52 mg/kg·bw。试验表明，壳聚糖硒的急性毒性小于亚硒酸钠。 试验三，壳聚糖硒对小鼠免疫功能及抗氧化作用的影响。选择150只25g左右的健康昆明种小白鼠，随机分为6组。1组为对照组，饲喂低硒基础日粮；2组为壳聚糖组；3组为亚硒酸钠组，在基础日粮中以亚硒酸钠的形式添加硒0.25mg/kg；4～6组为壳聚糖硒组，分别在基础日粮中以壳聚糖硒的形式添加硒0.125mg/kg、0.25mg/kg、0.5mg/kg，研究壳聚糖硒对小鼠的免疫功能及抗氧化作用的影响。结果显示，试验至60d，5组、6组的平均日增重与3组4组相比显著提高(P<0.05)，与1组、2组相比极显著提高(P<0.01)；6组血浆中GSH-Px活性显著高于5组(P<0.05)，极显著高于1组、2组(P<0.01)；6组血浆中SOD活性极显著高于1组、2组(P<0.01)；1组、2组血浆中H<,2>O<,2>、MDA的含量显著高于3组、4组(P<0.05)，极显著高于5组、6组(P<0.01)；3组、4组、5组、6组小白鼠的脾脏指数、胸腺指数、血浆中IgG的含量与1组、2组相比显著提高(P<0.05)。 试验表明，日粮中添加不同水平壳聚糖硒能提高小白鼠的平均日增重，提高小白鼠的免疫力及抗氧化能力。日粮中以壳聚糖硒形式添加硒0.5mg/kg效果好。试验四壳聚糖硒对小鼠的硒表观消化率的影响选择40只25g左右的健康昆明种小白鼠，随机分为4组。1组、2组为亚硒酸钠组，分别在基础日粮中添加硒0.25mg/kg、0.5mg/kg；3组、4组为壳聚糖硒组，分别在基础日粮中添加硒0.25mg/kg、0.5mg/kg。采用全收粪法，研究壳聚糖硒对小白鼠的硒表观消化率的影响。 结果显示，1组、2组小白鼠的硒表观消化率分别为54％、57％；3组、4组小白鼠的硒表观消化率分别为71％、74％。试验表明，与添加亚硒酸钠相比，日粮中添加壳聚糖硒能提高小白鼠的硒表观消化率。

目录

论文说明：中英文对照表

声明

摘要

前言

第一章 文献综述

第二章 壳聚糖硒的制备及理化性质测定

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

第三章 壳聚糖硒的小鼠急性毒性试验

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

第四章 壳聚糖硒对小鼠免疫功能及抗氧化作用的影响

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

第五章 壳聚糖硒对小鼠的硒表观消化率的影响

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

结论

参考文献

致谢