Calbindin-D28K在人牙齿及牙胚发育过程中的分布及其在牙乳头细胞体外矿化过程中的合成与调节

摘要

牙乳头间充质细胞具有分化为成牙本质细胞的能力,是研究牙齿发育特别是牙本质形成的重要模型.为了进一步探讨CaB在牙齿发育和牙髓损伤修复过程中的作用机理,采用细胞培养技术建立人牙乳头细胞体外矿化模型,研究CaB在矿化过程中合成与调节,产用激光共聚集显微镜观察牙乳头细胞分化过程中细胞内钙的变化;利用不同发育时期人牙胚和离体牙标本,用免疫组化方法研究CaB在人牙齿发育过程中的分布特征及其功能,以期揭示CaB在牙齿矿化中的作用.1.Calbindin-D28K在人牙胚不同发育时期分布特征及作用的研究;根据人牙胚发育时序,采用免疫组化方法观察牙胚发育不同时期CaB的表达情况.2.Calbindin-D28K在人健康和龋坏牙髓组织中分布特征比较研究;采用免疫组化方法观察了CaB在健康和龋坏人恒牙牙髓中的表达.3.体外培养人牙乳头细胞矿化模型的建立及其分化表型的表达;采用组织块法培养了人牙乳头细胞,ABC法免疫组化鉴定细胞来源于外胚层间叶组织,第三代细胞于矿化液中长期体外培养,检测不同培养时间细胞ALP活性,OC活性,用倒置显微镜观察细胞生长.4.1,25(OH)<,2>D<,3>对人牙乳头细胞的Calbindin-D28K表达及矿化能力的影响;用10<'-8>mol/L 1,25(OH)<,2>D<,3>处理矿化液长期培养的第28d细胞的24h.5.体外培养牙乳头细胞不同分化阶段胞内Ca<'2+>浓度的变化及1,25(OH)<,2>D<,3>的调节.采用体外培养牙乳头细胞,利用LSCM观察牙乳头细胞在其不同分化和矿化阶段以及在1,25(OH)<,2>D<,3>作用下细胞内钙的变化.

目录

英文缩略词表

前言

文献回顾

一、Calbindin-D28K的生物学特性

二、Calbindin-D28K在牙齿中的分布

三、Calbindin-D28K在牙齿发育过程中的分布变化规律

四、Calbindin-D28K的生理作用

第一部分Calbindin-D28K在人牙齿及牙胚发育过程中的分布

实验一钙结合蛋白Calbindin-D28K在人牙胚发育过程中的表达

实验二Calbindin-D28K在人健康和龋坏牙髓中免疫定位的比较研究

第二部分体外培养牙乳头细胞矿化过程中Calbindin-D28K合成与调节

实验一体外培养人牙乳头细胞矿化模型的建立及其分化表型的表达

实验二1，25(OH)2D3对体外培养人牙乳头细胞中Calbindin-D28K表达及矿化能力的影响

实验三体外培养牙乳头细胞不同分化阶段细胞内Ca2+浓度的变化及1，25(0H)2D3的影响

全文总结

参考文献

致谢

个人简历及在读期间发表论文

附图