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小肠移植大鼠一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶及低氧诱导因子1α表达的实验研究

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摘要

研究目的 1.熟练掌握大鼠异位节段性小肠移植动物模型的建立方法.2.研究大鼠小肠移植术后血清中NO的浓度变化及其与急性排斥反应的关系.3.研究大鼠小肠移植术后小肠组织中NOS、iNOS的活性变化,HIF-1α的表达,探讨HIF-1α对小肠移植的影响及相关作用.研究方法 实验分组:A组(对照组):正常SD大鼠;B组(热缺血组):建立大鼠热缺血再灌注模型,夹闭肠系膜上动脉1小时后再灌注分为0小时、1小时、2小时、6小时各亚组;C组(冷缺血组):SD大鼠,冷缺血2.5小时;D组(同系移植组):建立大鼠异位节段性小肠移植模型(冷缺血2.5小时),术后常规补液,给予抗生素;E组(同种移植组):建立大鼠异位节段性小肠移植模型(冷缺血2.5小时),术后常规补液,给予抗生素,同D组;F组:建立大鼠异位节段性小肠移植模型(冷缺血2.5小时),行同种移植,术后常规补液,给予抗生素,并肌注环孢菌素A.D、E、F组分别于术后第3、5、7天取材,其余各组按各时点取材.小肠标本HE病理染色,观察组织学变化;用硝酸还原酶法检测血清中NO浓度;用分光光度法测定移植小肠组织中NOS、iNOS的活性变化;用免疫组织化学的方法观察小肠组织中HIF-1α的表达.结论 1.血清NO在大鼠小肠缺血再灌注中的水平变化,提示NO在小肠移植过程中起重要作用.2.大鼠小肠同种移植后小肠组织中NOS及iNOS的活性和血清NO水平明显增高,但不与急性排斥反应的严重程度呈正相关的关系.血清NO水平的检测对于小肠移植急性排斥反应的发生可能具有早期的辅助诊断意义.3.大鼠小肠移植过程中HIF-1α表达的变化,提示HIF-1α对iNOS有转录激活作用,NO对HIF-1α有负向调节作用,有助于对小肠移植的治疗和判断预后提供新的思路和理论依据.

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