特异性环氧化酶-2抑制剂塞莱西布体外诱导肝癌细胞凋亡及其化疗协同作用

摘要

目的:该研究旨在研究特异性环氧化酶-2的抑制剂--塞莱西布在体外对人类肝癌、胃癌细胞的生长抑制、促凋亡作用,以及与化疗药物协同杀伤肝癌细胞的作用.通过观察其在不同浓度时抑制肝癌细胞生长及促凋亡作用,以及协同不同化疗药物的杀伤作用,初步探讨了该现象背后的可能机制,为临床应用打下基础.方法:1通过计数法测定肝癌细胞的生长曲线,获得该细胞系基本生长特性;2肝癌及胃癌细胞用含不同浓度(0,20,40,80,160和320 μ mol/L)的塞莱西布的培养基培养,24小时后应用MTT测定生长抑制率,电镜、流式细胞技术来观察细胞凋亡情况;3肝癌细胞用含不同浓度的5-氟尿嘧啶(0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1000、10000μ g/m L)、阿霉素(0.02、0.039、0.078、0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10 μ g/m L)、顺铂(0.39、0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200 μ g/m L)及塞莱西布(80 μ mol/L)的培养液培养,应用MTT来测定生长抑制率,电镜、流式细胞技术来观察细胞凋亡情况;4肝癌细胞用含80 μmol/L塞莱西布的培养基培养,分别用苏木精-伊红、Hoechst33258试剂以及免疫组化的方法染色.结论:1 塞莱西布对不同来源的肿瘤细胞均具有一定的生长抑制作用及诱导肿瘤细胞出现凋亡的作用,这种作用不仅是剂量依赖性的并且还是异质性的;2 塞莱西布可以协同化疗药物,增强其对肿瘤细胞的杀伤作用,这种作用是异质性的;3 经过塞莱西布处理前后的肿瘤细胞内,COX-2蛋白的表达有比较明显的下降.

目录

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缩略语表

前言

文献回顾

正 文

实验器材

第一部分SMMC-7721细胞的培养及生长曲线的测定

1前言

2材料

3方法

4结果

5讨论

第二部分塞莱西布体外对人类肝癌及胃癌细胞的生长抑制作用

1前言

2材料

3方法

4结果

5讨论

第三部分塞莱西布体外增强化疗药物对人类肝癌细胞的杀伤作用

1前言

2材料

3方法

4结果

5讨论

第四部分COX-2在SMMC-7721细胞内的表达情况

1前言

2材料

3方法

4结果

5讨论

小 结

参考文献

附 录

个人简历

致 谢