变形链球菌葡聚糖结合蛋白B功能区片段克隆、原核表达及防龋初步研究

摘要

本研究通过PCR技术克隆GbpB功能区基因片段，并将其克隆至原核表达载体pET-DsbA中，并通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌中表达，成功得到其融合蛋白并进行纯化，用纯化的功能区蛋白进行葡聚糖 结合功能实验并免疫SD大鼠观察其免疫原性及防龋效能。 应用PCR技术扩增葡聚糖结合蛋白B功能区基因片段，定向插入 pET-DsbA载体，构建GbpB功能区原核融合表达质粒，将酶切鉴定正确的阳性克隆进行序列测定，测序结果与文献报道一致。 建立定菌鼠致龋实验模型，用纯化的GbpB功能区蛋白和GbpB全长蛋白通过颌下腺区皮下注射途径免疫定菌鼠，采用keyes龋齿计分法评价龋损程度。结果发现实验组龋损范围和龋坏程度均明显低于对照组；功能区蛋白组和GbpB全长蛋白组之间龋损无显著性差异，说明GbpB功能区蛋白和GbpB全长蛋白具有同样的免疫防龋效能。

目录

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论文说明

缩略语表

前言

文献回顾

一、变形链球菌的主要毒力分子

二、防龋疫苗的主要类型

三、葡聚糖结合蛋白(Gbps)

第一部分葡聚糖结合蛋白B功能区片段克隆、原核表达及纯化

材料和方法

结果

讨论

第二部分葡聚糖结合蛋白B功能区蛋白免疫防龋功能研究

材料和方法

结果

讨论

小 结

参考文献

个人简历和研究成果

致 谢