基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在哮喘气道重构中的作用以及神经生长因子对其的调节作用的研究

摘要

本实验主要分为两部分：一、通过测定不同时期哮喘豚鼠肺脏基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMP)的含量，探讨二者在哮喘气道重构发病中的作用。二、通过抗神经生长因子抗体对哮喘豚鼠的干扰，测定哮喘豚鼠肺脏基质金属蛋白酶(MMPs)的含量，探讨NGF对气道重构的影响。 一、探讨哮喘豚鼠模型中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMP)在哮喘气道重构发病中的作用。 研究方法：重复雾化吸人卵蛋白建立豚鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘激发4WK、6WK和8WK组。免疫组化方法结合显微图像分析检测MMP-9、TIMP-1的表达。半定量PCR检测MMP-9及TIMP-1mRNA水平。 研究结果：①哮喘各组动物均出现管壁增厚、平滑肌增生等气道重构的特征性改变。②哮喘豚鼠MMP-9的mRNA表达：哮喘4WK组为(0.52±0.05)，哮喘6WK组为(0.74±0.05)；哮喘8WK组为(0.48±0.04)；对照组为(0.21±0.04)；哮喘各组与对照组组间比较差异有统计学意义(P≤0.05)。哮喘豚鼠TIMP-1的mRNA水平：哮喘4WK组为(0.36±0.04)；哮喘6WK组为(0.83±0.05)；哮喘8WK组为(0.97±0.05)；对照组为(0.20±0.02)；哮喘各组与空白对照组组间比较差异有统计学意义(P≤0.05)。③免疫组化的结果和RT-PCR的结果一致。④在哮喘各时段组中，MMP-9的表达增高自第4WK时明显变缓，而TIMP-1仍持续增高，导致MMP-9/TIMP-1比例下降。 二、探讨哮喘豚鼠模型中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与气道重构的关系及抗神经生长因子抗体干预对气道重构的影响。 研究方法：重复雾化吸人卵蛋白4周建立豚鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘组、抗神经生长因子(NGF)抗体干预组。免疫组化方法结合显微图像分析检测MMP-9表达。半定量PCR检测MMP-9mRNA水平。 研究结果：(1)哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重构的特征性改变，MMP-9mRNA水平和蛋白表达均明显增高；(2)NGF抗体组与哮喘组比较，炎症反应轻微，平滑肌增生、黏液分泌不明显，MMP-9mRNA水平和蛋白表达均降低，与对照组差异无显著性。 研究结论： (1)少量、多次变应原吸入可导致气道重构，哮喘的气道重构与MMP-9和TIMP-1的表达有密切相关，而二者的比例可能反映气道重构的严重程度。 (2)抗NGF抗体干预可改变MMP-9的表达，从而延缓气道重构的发生。

目录

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缩略语表

前言

文献回顾

实验 第一部分哮喘豚鼠气道重构中的基质金属蛋白酶-9及其抑制物TIMP-1的表达

实验 第二部分基质金属蛋白酶-9在哮喘豚鼠气道重构中的作用及抗神经因子抗体的干预影响

小节

参考文献

个人简历和攻读学位期间的研究成果

致谢