冠状动脉支架内再狭窄影像学评价及基因干扰防治机制研究

摘要

第一部分双源CT冠脉成像在冠脉狭窄中的对比研究
　　目的：将双源CT（DSCT）冠状动脉成像与X线冠状动脉造影（CAG）进行对比研究，以评价DSCT对冠状动脉狭窄诊断中的准确性。
　　方法：47例疑似冠心病患者（男35例，女12例，年龄63.32±10.41岁，心率76.2±14.8/min），在不控制心率情况下行DSCT冠脉成像检查，将DSCT原始数据行多平面重建（MPR）、曲面重建（CPR）、最大密度投影（MIP）及容积再现技术（VRT）图像重建。CAG作为诊断冠状动脉狭窄参考标准在DSCT检查后2周内进行，DSCT与CAG检查结果分别由两名医师进行双盲评估。
　　结果：DSCT图像可评价节段达到94.98％（625/658），图像优良率95.52％(597/625)。DSCT对冠状动脉狭窄诊断的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为91.8％、97.7％、94.3％、97.5％，其中对左主干、左前降支及右冠状动脉的敏感性及特异性达到95％，对角支、左回旋支分支及右冠状动脉远端诊断的敏感性有所下降，分别为86％、71.4％、76.9％。
　　结论：在不控制心率的情况下，DSCT作为冠心病患者检查的可靠方法，可以广泛地应用于冠心病患者的筛查、冠状动脉搭桥/支架术前评估及术后随访。
　　第二部分DSCT在冠脉支架内再狭窄评价中的应用研究
　　目的：对双源CT冠状动脉成像与冠状动脉造影进行对比研究，以评价DSCT对冠状动脉支架内再狭窄诊断的准确性。
　　方法：62例植入支架术后患者共117枚支架在控制心率(<75bpm)下行DSCT冠脉成像检查，检查支架原始轴位图像,将DSCT原始数据行多平面重建（MPR）、曲面重建（CPR）、最大密度投影（MIP）及容积再现技术（VRT）图像重建。CAG作为诊断冠状动脉支架内再狭窄参考标准在DSCT检查后2周内进行，DSCT与CAG检查结果分别由两名医师进行双盲评估。
　　结果：DSCT图像可评价节段达到86.3％（101/117），DSCT共正确判断12/16枚支架发生支架内再狭窄。DSCT对冠状动脉狭窄诊断的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为80％、95.3％、85.7％、96.4％。支架直径≥3.5mm，DSCT对支架的可评价性达到100％，支架直径≤2.75mm，DSCT对支架的评价能力较差。
　　结论：在控制心率的情况下，DSCT可以作为直径较大支架发生支架内再狭窄的筛查手段，尤其对较大直径支架准确性更高。
　　第三部分基因干扰抑制内皮细胞IL-6表达对平滑肌细胞迁移的影响
　　目的：采用共培养模型模拟内皮细胞对平滑肌细胞作用方式，利用siRNA技术抑制内皮细胞IL-6生成，观察其对平滑肌细胞迁移能力影响。
　　方法：采用RT-PCR测定LPS刺激EA.HY926细胞表达IL-6mRNA时间梯度与浓度梯度；针对IL-6构建短发卡状siRNA真核表达载体pGensil-1.1-IL-6，通过lipofectamine 2000转染EA.HY926细胞抑制由LPS刺激EA.HY926细胞产生IL-6，并运用RT-PCR及ELISA检测抑制效果；采用共培养模型模拟EA.HY926细胞对HUVSMC作用方式，应用RT-PCR及Western Blot技术测定EA.HY926细胞受LPS刺激组、siRNA干扰+LPS组及空白对照组的HUVSMC表达MMP-9mRNA及蛋白含量，并通过结晶紫细胞染色观察HUVSMC迁移数量。
　　结果：100mg/LLPS刺激EA.HY926细胞在8小时IL-6mRNA表达量最高，干扰组IL-6.1siRNA较LPS刺激组EA.HY926细胞IL-6表达减少60％（153±16.3/372±37.8pg/mL,P＜0.01）。共培养模型中，EA.HY926 siRNA干扰组较单纯LPS刺激组HUVSMC表达MMP-9 mRNA与蛋白降低，结晶紫细胞染色HUVSMC细胞迁移数量减少。
　　结论：采取siRNA可以技术抑制内皮细胞IL-6合成，这种抑制作用通过降低平滑肌细胞MMP-9表达等途径，进而减弱平滑肌细胞的迁移能力，有可能针对IL-6的基因干扰技术是治疗支架再狭窄的新途径。

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缩略语表

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前言

文献回顾

第一部分支架内再狭窄的产生机制及影响因素

1 ISR 产生机制

2 影响冠状动脉支架内再狭窄因素

第二部分支架内再狭窄评价与防治方法

1 支架内在狭窄的评价方法

2 ISR 防治

正文

实验一DSCT 在冠脉狭窄诊断中的应用价值研究

1 资料与方法

2 结 果

3 讨 论

4 结 论

实验二DSCT 在冠脉支架再狭窄评价中的应用

1 资料与方法

2 结 果

3 讨 论

4 结 论

实验三RNA 干扰内皮细胞分泌 IL-6 对平滑肌细胞迁移的影响

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

4 结 论

小结

参考文献

个人简历和研究成果

致谢