IL-11Rα靶向性近红外荧光探针在骨肉瘤中的分子成像研究

摘要

背景:
　　影像学检查是无创、早期发现肿瘤的重要途径,而现有影像学检查手段难以早期、特异性的对骨肉瘤做出诊断。分子成像可在细胞学或基因水平对疾病进行成像诊断。近红外光学成像是一种非损伤性体内分子成像,其可以通过光学成像和灵敏的荧光显微镜获知病理状况及准确的实时信息,从而为肿瘤早期诊断及靶向性治疗提供影像学依据。IL-11Rα与骨肉瘤的发生发展有关,是预后差的一个特征标志。IL-11Rα具有与IL-11及其类似物高亲和力结合的特性,可作为骨肉瘤原发灶特异性显像诊断及治疗的靶点。
　　目的:
　　本实验通过对骨肉瘤中IL-11Rα的表达进行非损伤性评价,探讨靶向IL-11Rα的IL-11造影剂在异种种植骨肉瘤模型中成像的特异性,为骨肉瘤的诊治提供一种新的途径和方法。
　　方法:
　　1.通过免疫组化染色检测人骨肉瘤组织标本中IL-11Rα的表达水平。通过流式细胞术及Western-Blot方法检测骨肉瘤SOSP-9607细胞系中IL-11Rα的表达水平。
　　2.通过共聚焦显微镜观察IL-11造影剂(环九肽和近红外染料NIR-783偶联)与骨肉瘤细胞系SOSP-9607的体外结合特性。建立其荷瘤裸鼠模型,经尾静脉注射IL-11造影剂(5nmol/0.1m1)后,进行多模式活体成像,在不同时间点连续采集图像,检测造影剂在肿瘤组织中的摄取情况及其药代动力学变化情况。
　　3.对离体肿瘤及脏器进行荧光成像并进行病理切片,免疫组织化学以及HE染色证实离体成像与体内成像结果的一致性。计算靶点背景比及背景噪声比,探讨肿瘤靶向性显影的最佳时间段。
　　结果:
　　1.免疫组织化学染色证实89.5％的人骨肉瘤组织中IL-11Rα表达阳性,Western-blot实验证实骨肉瘤细胞系SOSP-9607中IL-11Rα呈阳性表达,流式细胞学检测其阳性表达百分比为62.9%。
　　2.合成IL-11模拟物环九肽,使其与近红外染料偶联(NIR-783),研制了IL-11造影剂。体外细胞结合试验表明,IL-11造影剂能与IL-11Rα阳性的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞特异性结合。体内试验结果表明,通过近红外荧光成像的方法,利用IL-11造影剂,能够对人骨肉瘤荷瘤裸鼠模型进行实时、动态、特异性的靶向性显影。
　　3.造影剂进入体内后迅速于全身显影,在血液和非靶向组织中快速清除,通过肝脏和肾脏同时代谢,药代动力学良好,其动态显示效果表明,注射造影剂8h时图像信噪比高,本底低,适于靶向性显像。免疫组织化学及HE染色证实高信号组织来源于肿瘤。
　　结论:
　　1.IL-11Rα可作为骨肉瘤特异性成像的靶点;
　　2.IL-11造影剂可与IL-11Rα阳性的骨肉瘤SOSP-9607细胞特异性结合;通过近红外荧光成像的方法,利用IL-11造影剂,能够对人骨肉瘤荷瘤裸鼠模型靶向性显影,其动态显示效果表明注射造影剂8h时图像适于靶向性显影;
　　3.IL-11近红外荧光造影剂药代动力学良好,有望为IL-11Rα表达阳性的骨肉瘤提供新的分子显像诊断策略。

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缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言

文献回顾

1 骨肉瘤

2 近红外荧光活体成像技术

3 IL-11系统

正文

实验一 IL-11Rα在人骨肉瘤组织标本及骨肉瘤细胞系SOSP-9607中表达

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

实验二 IL-11造影剂在人骨肉瘤细胞系sosp-9607及荷瘤裸鼠模型中成像

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

小结

参考文献

个人简历和研究成果

致谢