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大段同种异体骨移植复合BMP和TGF-β对兔桡骨中段骨缺损愈合的影响

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声明

前言

实验材料和方法

1.实验材料和仪器

2.方法

3.术后观察和检测指标

4.统计学分析

结果

讨论

1.动物模型可靠性

2.同种异体冻干松质骨移植的评价

3.BMP2和TGF-β2与骨缺损愈合

4.本实验的创新之处

结论

附图

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:通过动物实验研究兔桡骨中段10mm连同骨膜的骨缺损,冷冻干燥同种异体松质骨移植后,补充转化生长因子β<,2>(TGF-β<,2>)和骨形态发生蛋白2(BMP<,2>)对骨缺损愈合的影响,探讨外源性TGF-β<,2>和BMP<,2>复合同种异体骨对骨缺损愈合的作用。 方法:制备冷冻干燥同种异体松质骨,于48只新西兰白兔两侧桡骨中段造成10mm的缺损,在骨缺损局部单独或联合应用TGF-β<,2>和BMP<,2>与同种异体骨复合,分为四大组。A组:同种异体骨与BMP<,2>复合;B组(对照组):自体骨;C组:同种异体骨与TGF-β<,2>复合;D组:同种异体骨与TGF-β<,2>、BMP<,2>复合;术后4、8、10、12w,通过大体观察、X线检查、灰度分析、骨密度测定、骨痂钙含量和组织学观察;12w的桡骨标本另行生物力学测定来比较各组标本缺损愈合情况。 结果:术后各组均无明显的免疫排斥反应。B组的骨痂钙含量、骨缺损愈合情况和愈合后的力学强度明显优于A、C、D组(P<0.01),D组优于A、C组(P<0.05),C组优于A组(P<0.01)。X线片显示B组和D组均于12w愈合。C组骨缺损区在同一时期内骨痂或新骨形成、软骨骨化、髓腔形成均早于A组,D组在12w的X线片显示已接近B组。A组在术后8w,仅在骨缺损端有少量新骨形成,并有部分软组织填充,12w时仍呈骨不连征象。C组骨缺损骨密度值在第8w和10w明显高于A组(P<0.01);A组和C组骨缺损区的骨密度在各时期均低于D组,其中在10w和12w具有统计学意义(P<0.01和P<0.05)。组织学检查:D组在同一时间点,血管形成、成骨细胞分化和增殖、骨痂形成和塑形等方面都早于A、C组,与B组没有明显差别。12w生物力学测定:D组三点弯曲最大应力明显高于A、C组(P<0.05),与B组无明显差别(P>0.05)。 结论:TGF-β<,2>和BMP<,2>在骨缺损愈合过程中均发挥了重要的作用。在兔骨缺损周围局部应用外源性TGF-β<,2>和BMP<,2>与同种异体骨复合,可明显促进骨缺损愈合,使骨痂量增加,增强骨折愈合后的力学强度。并且在骨折愈合时间上接近自体骨移植骨折愈合的时间,从而在临床上缩短了需要大段植骨患者的愈合时间,减轻了患者痛苦。单用TGF-β<,2>的作用强于BMP<,2>。它们联合应用时,这种作用进一步增强,在促进骨缺损愈合方面具与有协同作用。同时也为异体骨复合何种因子及因子的剂量提供可靠的参考指标。

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