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幽门螺杆菌对阿莫西林耐药机制的初步探索

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论文说明:缩略词表

第一章前言

第二章材料和方法

第三章实验结果

第四章讨论

第五章结论

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摘要

目的:通过体外诱导产生幽门螺杆菌对阿莫西林耐药菌株,对耐药菌株和敏感菌株表达差异蛋白点的功能进行鉴定。 方法:以J99为出发菌株,采用连续传代法,将J99在含有AMX的抗性平板上连续传代,获得耐药菌株,采用三氯醋酸/丙酮沉淀法制取敏感菌株和耐药菌株的全菌蛋白,对耐药菌株和敏感菌株做双向凝胶电泳,通过Image Master 2D Elite软件对其蛋白质图谱进行比较,从而找到表达差异的蛋白,对表达差异的蛋白点进行胶内酶解,利用质谱技术和生物信息学分析差异蛋白的性质和功能。 结果:通过质谱和数据库搜索对这些表达差异的蛋白点进行鉴定显示8个表达差异的蛋白斑点,其中1个蛋白斑点S-adenosylmethionine synthetase只在AMX原始菌株中表达,1个蛋白斑点co-chaperonin GroES只在耐药菌株中表达。2个蛋白斑点30S ribosomal protein S4和flagellin在耐药菌株中表达上调,4个蛋白斑点2-oxoglutarate ferredoxin oxidoreductase、3-OXOACD COA-TRANSFERASE,SUBUNIT A、NADH dehydrogenase subunit Ⅰ和hypothetical protein在敏感菌株中表达量高于耐药菌株。 结论:通过体外诱导产生一株耐阿莫西林菌株,当有效的药物作用于细菌时,细菌的代谢功能发生变化,导致细菌表达的蛋白发生改变,对这些差异表达蛋白的研究有助于了解细菌耐药机制的形成。

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