冷束缚应激对实验大鼠变应性鼻炎鼻黏膜中嗜酸性粒细胞及Th细胞因子表达的影响

摘要

目的:1、建立SD大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis)及冷束缚应激动物模型，观察其鼻粘膜的组织形态学变化。 2、研究Th细胞因子表达的IL-2和IL-6模型大鼠鼻粘膜中的表达情况，探讨它们与变应性鼻炎之间的关系。 方法：50只健康雌性大鼠随机分为五组；空白对照组(10只)，变应性鼻炎模型组(AR组，10只)、先应激后造模组(10只)、先造模后应激组(10只)及应激与造模同时进行组(10只)。 AR组模型建立的方法：以卵清蛋白(Sigma，美国)0.30mg作抗原，氢氧化铝粉末30mg作佐剂，加生理盐水1ml形成混悬液，腹腔内注射，隔日1次，共7次。腹腔注射免疫完成后，每侧鼻腔均以5％卵清蛋白10μl，局部免疫，每日1次，共7次。对照组动物以生理盐水代替卵清蛋白，其余方法和步骤不变。 冷束缚应激模型建立的方法：用乙醚吸入法将大鼠麻醉后，再绑扎四肢，背部固定于自制捆鼠板上，正立位置于18℃冷水中，使水面达胸骨剑突水平，应激2h，1次/天，持续3周。在制备AR模型同时于固定时间(11：00am)，给予冷束缚应激，制备应激与AR造模同时进行组。 用25％乌拉坦(0.4ml/100g)行腹腔注射麻醉，将大鼠四肢及上齿固定于鼠板上，经左心室用4％多聚甲醛进行内固定后提取各大鼠鼻中隔两侧的呼吸区黏膜制备成石蜡切片，用组织化学方法观察变应性鼻炎经冷束缚应激后鼻粘膜中嗜酸性粒细胞的组织形态学改变；用免疫组织化学(SABC)方法检测IL-2和IL-6在各组大鼠鼻粘膜中的表达和变化。 结果：①显微镜下利用图像分析软件进行嗜酸性粒细胞计数：选取完整鼻中隔黏膜组织，于高倍镜(20×10)下计数5个视野后取平均数，评分标准为：未见或少见嗜酸性粒细胞(0～2个)，0分；嗜酸性粒细胞数3～10个，1分；嗜酸性粒细胞11～50，2分；嗜酸性粒细胞数大于50，3分；②IL-2和IL-6染色：以胞浆有棕黄色染色者为阳性细胞，于高倍镜(20×10)选择鼻黏膜组织下计数5个视野，评分标准：小于5％的细胞阳性，阴性；阳性细胞比例为6％～20％，弱阳性；阳性细胞比例为21％～40％，中度阳性；阳性细胞数比例大于40％，强阳性；经冷束缚应激后的实验组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞和IL-6显著地大于AR组及空白对照组(p＜0.05)，而应激与造模颠倒先后顺序后，两组之间无明显变化(P＞0.05)；IL-2在实验大鼠中经冷束缚应激后数量明显减少，与AR组及空白对照组相比(p＜0.05)，经冷束缚应激的各组间无明显变化，(P＞0.05)。 结论：鼻黏膜组织中嗜酸性粒细胞及主要由Th1分泌细胞因子IL-2和由Th2分泌的细胞因子IL-6在各组中的表达有所不同，嗜酸性粒细胞及IL-6在空白对照组几乎不表达，在AR组中度表达，而在经过冷束缚应激的各组大鼠中明显表达；由TH1分泌的IL-2呈现明显减少趋势，说明冷束缚应激在诱导实验大鼠变应性鼻炎的过程中可能起着重要的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

一、材料和方法

二、结果

三、讨论

四、结论

参考文献

附录

综述　应激与变应性鼻炎

个人简历

致谢