两种染铝小鼠阿尔茨海默病(AD)模型的形态学特征及Apo E基因在铝致AD中的作用

摘要

目的：比较C57BL/6J小鼠和APP/PS-1双转基因小鼠分别染铝后的形态学特征及脑组织中Aβ蛋白的表达情况，探讨铝中毒APP/PS-1双转基因小鼠复合模型是否可以较好的模拟AD的特征性病理改变，比较染铝后的Apo E基因敲除小鼠与C57BL/6J小鼠的形态学特征及脑组织中Aβ蛋白的表达情况，探讨Apo E基因在铝致AD中的作用。 方法：健康雄性C57BL/6J小鼠、APP/PS-1双转基因小鼠和健康雄性Apo E基因敲除小鼠各16只，按体重随机分为2组，对照组和实验组，每组8只。对照组注射生理盐水，实验组连续五天经侧脑室分别注射1.0％AlCl3，3μl/只。而后处死小鼠，取脑，分离大脑皮层和双侧海马，观察小鼠脑组织形态学病理特征改变。免疫组化检测Aβ蛋白在皮质和海马的表达情况。 结果：常规HE染色镜下可见C57BL/6J小鼠、Apo E基因敲除小鼠和染铝的Apo E基因敲除小鼠大脑皮质神经元数量较多，海马锥体细胞层排列整齐，神经元体积较大；核圆，核仁明显，细胞轮廓清晰；染铝后的C57BL/6J小鼠和APP/PS-1双转基因小鼠及未染铝的APP/PS-1双转基因小鼠的大脑皮质内神经元体积变小，海马锥体细胞层表现为锥体细胞稀疏、松散，层次不清，出现零散的严重损伤细胞，主要表现为细胞核呈固缩状，核周及胞浆空泡变性细胞结构破坏以及细胞轮廓模糊。皮质和海马神经元细胞颗粒空泡样变计数结果显示铝中毒APP/PS-1双转基因复合模型和铝中毒C57BL/6J小鼠模型实验组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)，铝中毒APP/PS-1双转基因复合模型和铝中毒C57BL/6J小鼠模型之间差异有统计学意义(P＜0.05)；Apo E基因敲除小鼠模型实验组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)，染铝的Apo E基因敲除小鼠和染铝的C57BL/6J小鼠相比差异有统计学意义(P＜0.05)。 Bielschowsky银染色结果显示C57BL/6J小鼠和Apo E基因敲除小鼠模型大脑皮质及海马均未见神经纤维缠结(NFT)，铝中毒C57BL/6J小鼠大脑皮质可见个别NFT；铝中毒APP/PS-1双转基因小鼠大脑皮质见到较多比较密集的NFT。两种模型中实验组与对照组比较，神经元NFT样改变数量增加显著(P＜0.05)；铝中毒APP/PS-1双转基因复合模型和铝中毒C57BL/6J小鼠模型之间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。Apo E基因敲除小鼠模型实验组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)，染铝的Apo E基因敲除小鼠和染铝的C57BL/6J小鼠相比差异有统计学意义(P＜0.05)。 刚果红染色结果显示：铝中毒C57BL/6J小鼠模型组和Apo E基因敲除小鼠模型小鼠大脑皮质均未见老年斑(SP)，铝中毒APP/PS-1双转基因小鼠皮层和海马可见散在分布的未成熟型SP。 免疫组织化学染色结果：镜下可见各组小鼠大脑皮质和海马区锥体细胞层均有Aβ蛋白免疫反应阳性神经元，阳性反应定位于细胞胞浆内，染色呈棕黄色。用Image—Pro plus6.0图像分析软件分析，铝中毒APP/PS-1双转基因复合模型和铝中毒C57BL/6J小鼠模型实验组与对照组比较，皮质阳性细胞平均积分光密度值(IOD)差异有统计学意义(P＜0.05)，铝中毒APP/PS-1双转基因复合模型和铝中毒C57BL/6J小鼠模型之间IOD差异有统计学意义(P＜0.05)；Apo E基因敲除小鼠模型实验组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)，染铝的Apo E基因敲除小鼠和染铝的C57BL/6J小鼠相比差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论：铝可导致小鼠大脑皮质和海马神经细胞形态结构发生改变，出现类似AD的病理特征改变；铝中毒APP/PS-1双转基因小鼠复合模型比单纯铝中毒C57BL/6J小鼠模型能够更好的模拟AD的病理特征改变；Apo E基因在铝致AD中存在作用，作用机制有待于进一步研究。

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文摘

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论文说明：英文缩写词

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前言

第一节 铝中毒C57BL／6J小鼠模型与铝中毒APP／PS-1双转基因小鼠复合模型组织形态学特征比较研究

1材料与方法

2结果

3讨论

第二节 Apo E基因在铝致AD中的作用

1材料与方法

2结果

3讨论

结论

参考文献

综述 阿尔茨海默病发病机制及实验室动物模型研究进展

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