原花青素对小鼠视网膜光化学损伤的保护作用

摘要

目的:观察小鼠视网膜光化学损伤后病理形态及凋亡相关指标的改变，探讨原花青素(proanthocyanidins，PC)对小鼠视网膜光化学损伤(retinal photochemicai injury)的保护和拯救作用。
　　 方法:
　　 1.昆明小鼠50只，随机分为A组(正常对照组)、B组(光化学损伤模型组)和C组给药组[分为C1组(仅造模前给药组)，C2组(造模前后给药组)和C3组(仅造模后给药组)]，每组均有10只小鼠。
　　 2.造模方法：自制光损伤箱，箱内6个面均装有36 W的冷光源荧光灯共20个，光照度为(16473.5±402.8)1x。动物分光照前先暗适应12 h，之后光照12 h，连续3个循环，总光照时间为36 h。在光照全过程中，箱内温度保持在28～32℃。C组小鼠按400mg/kg灌胃给原花青素混悬液；所有动物于造模后第7天处死并取出眼球行石蜡包埋切片。
　　 3.部分石蜡切片进行HE染色，光镜下观察视网膜形态学改变，并对视网膜外核层厚度进行测量。
　　 4.部分石蜡切片进行凋亡原位检测(TUNEL法)标记凋亡细胞，并计算凋亡指数(AI)。
　　 5.统计学分析用SPSS13.0统计软件进行，计算各组平均值(x)和标准差S，两组间比较用方差分析。
　　 结果:
　　 1.正常小鼠视网膜内外节排列整齐，分界清晰，外核层排列紧密，染色均匀，细胞形态规整。
　　 2.视网膜光化学损伤模型成功建立，HE染色形态学观察发现：视网膜各层结构疏松，内外节破坏严重，外核层明显变薄，仅留1～2层。
　　 3.给药组中，C2组视网膜十层结构较完整，分界较清晰，外核层细胞排列基本整齐，内外节轻度肿胀。C1组视网膜内外节轻度肿胀，间隙增宽，外核层间隙稍增宽。C3组视网膜结构较C1组内外节肿胀明显，间隙增宽，外核层细胞部分受到损害，排列紊乱。
　　 4.TUNEL染色正常小鼠视网膜呈阴性；光化学损伤组在外核层有大量阳性着染细胞核，原花青素给药组仅见少量阳性着染细胞核，C2组几乎没有阳性着染细胞核。
　　 5.统计结果显示，视网膜外核层厚度及凋亡指数的结果，组组间比较均有统计学意义(p＜0.05)。
　　 结论:原花青素能保护和拯救光化学损伤后的视网膜，并能显著抑制视网膜光化学损伤中感光细胞的凋亡。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章研究方法与内容

一、小鼠视网膜光化学损伤模型的建立

二、小鼠视网膜光镜组织病理学

三、实验结果观察

四、统计学分析

第二章实验结果

一、鼠视网膜光镜下外核层形态学观察及统计学分析

二、小鼠视网膜凋亡细胞检测(TUNEL法)

第三章讨论

一、小鼠视网膜光化学损伤动物模型的制备

二、原花青素对小鼠视网膜光化学损伤的保护作用

第四章结论

参考文献

附图

综述：视网膜光化学损伤的机制及影响因素

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致 谢