吡格列酮对缺血再灌注大鼠心肌细胞内质网应激致凋亡途径的影响

摘要

目的:
　　 观察PPARγ（过氧化物体增殖物激活受体）激动剂吡格列酮预处理，对心肌缺血再灌注所致的细胞凋亡及内质网特有伴侣蛋白GRP78、凋亡水解酶caspase-12表达的影响，探讨吡格列酮在内质网应激途径的心肌保护作用。
　　 方法:
　　 健康雄性Wistar大鼠，体重200±30g，随机分为假手术组，缺血再灌注组（I/R组）以及吡格列酮预处理组。I/R组及假手术组灌服生理盐水，2ml/d，共7d，吡格列酮预处理组再分为3组，分别给予吡格列酮3mg/kg.d（低剂量组），lOmg/kg.d（中剂量组），20mg/kg.d（高剂量组），溶于2ml生理盐水中灌胃，共7d。制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型:气管插管、动物呼吸机维持呼吸，监测心电图变化，开胸，结扎冠状动脉前降支30min，再灌注2h。造模成功后腹主动脉采血，离心，分离血清，采用全自动生化仪检测各组血清中LDH、CK-MB水平;取出心脏，洗净血污，留取左心室前壁，石蜡包埋、切片后，采用TUNEL（原位末端标记）染色法检测各组心肌细胞凋亡数，采用SABC（链酶亲和素一过氧化物酶）免疫组织化学法检测GRP78及caspase-12蛋白的表达，并对其表达进行半定量分析。
　　 结果:
　　 1.I/R组大鼠血清中LDH、CK-MB水平均明显高于假手术组(p＜0.05），不同剂量吡格列酮预处理后血清LDH、CK-MB水平明显低于I/R组(p＜0.05)，但吡格列酮3mg组和lOmg组相比无显著差异（p＞0.05）。2.I/R组心肌细胞凋亡指数比假手术组明显增多(p＜0.05)。低、中、高剂量吡格列酮预处理各组的细胞凋亡指数较I/R组显著降低(p＜0.05)，吡格列酮3mg组和lOmg组相比无显著差异(p＞0.05)。3.I/R心肌组织中caspase-12、GRP78蛋白的表达与假手术组比较明显升高(p＜0.05)、给予大鼠吡格列酮预处理治疗后，再作缺血再灌注模型,3种剂量吡格列酮预处理组与l/R组比较都显著减少了心肌细胞蛋白GRP78及caspase-12表达(p＜0.05)，但吡格列酮3mg组和lOmg组相比无显著差异(p＞0.05)。
　　 结论:
　　 吡格列酮可通过抑制I/R导致的过度内质网应激，下调GRP78、caspase-12表达水平，减轻内质网应激相关凋亡而减轻心肌缺血再灌注损伤，且大剂量吡格列酮的心肌保护作用更明显。

目录

声明

插图和附表清单

英文缩略词

摘要

前言

实验材料与方法

1．实验动物

2 实验试剂

3 实验仪器

4 实验方法

5 心肌组织GRP78和caspase-12蛋白表达的检测及半定量分析

6 统计学分析

结果

1．吡格列酮对血清心肌酶CK-MB及LDH水平的影响

2．吡格列酮对心肌细胞凋亡的影响

3．吡格列酮对内质网应激相关蛋白GRP78、caspase-12表达的影响。

讨论

1 缺血再灌注损伤(IRI)

2 细胞凋亡与IRI

3 内质网应激反应

4 TZDs与I/R

结论

参考文献

综述

个人简介

致谢