雌激素对成骨细胞增殖及TGF-β1和IGF-1基因表达的影响

摘要

目的：
　　1、观察雌二醇在体外对大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖情况。
　　2、研究不同浓度的雌二醇对体外大鼠颅盖骨成骨细胞TGF-β1和IGF-1mRNA表达的影响。
　　3、初步探讨雌二醇对成骨细胞的作用机制。
　　方法：
　　1、采用酶消化法体外分离、培养原代大鼠成骨细胞，镜下观察其形态、并对其进行特征性染色的鉴定。
　　2、以原代培养大鼠成骨细胞为实验模型，分空白组和对照组(0、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5M)。雌二醇的作用浓度参考文献[1]。用不同浓度的雌二醇刺激成骨细胞24h,分别用MTT法测定成骨细胞的增殖情况。采用实时荧光定量PCR法测定TGF-β1和IGF-1mRNA表达情况。
　　3、采用SPSS13.0统计学软件，对实验所得数据进行分析,结果用均数±标准差(x±s)表示。组间的比较采用LSD法分析，当P＜0.05时，差异有统计学意义。
　　结果：
　　1、体外培养大鼠成骨细胞，植入24h后的细胞充分铺展形态多样呈梭形、三角形、多角型或不规则型。胞核呈圆形居中或偏于一侧，周围的细胞则以突起相连接。碱性磷酸酶染色呈阳性，胞浆呈灰黑色块状染色颗粒；茜素红染色呈阳性，可见多层重叠、大小不一的橘红色结节。
　　2、不同浓度的雌二醇作用于成骨细胞24h后，MTT比色法测定10-9mol/L~10-6mol/L浓度的雌二醇均可促进成骨细胞的增殖，差异有统计学意义（P<0.05），其中10-7mol/L为最高峰值;10-5mol/L组与对照组比较有抑制作用，但差异无统计学意义（P>0.05）。
　　3、不同浓度的雌二醇作用于成骨细胞24h后，通过实时荧光定量PCR法检测成骨细胞中TGF-β1、IGF-1mRNA的表达均增加，在一定浓度范围内且呈剂量依赖关系。对照组与实验组进行比较，实验组组间进行比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：
　　1、雌激素可以促进成骨细胞的增殖。
　　2、雌激素可以增加TGF-β1和IGF-1基因的表达。
　　3、E2可能是通过增加TGF-β1和IGF-1基因的表达，促进成骨细胞的增殖。

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中文摘要

英文摘要

缩略语表

前 言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

结 果

一、 成骨细胞的形态观察及鉴定

二 、雌激素对成骨细胞增殖的影响

三 、雌激素对成骨细胞TGF-β1、IGF-1 mRNA表达的影响

讨 论

一、E2对成骨细胞增殖的影响

二、E2对成骨细胞TGF-β1和IGF-1 mRNA表达的影响

结 论

参考文献

综 述

个 人 简 介

致谢