非离子型造影剂过敏反应机制及BAT的诊断意义

摘要

目的：
　　通过对免疫正常人、β-内酰胺类药物过敏者以及非离子型造影剂过敏者血液中嗜碱性粒细胞CD63分子、肥大细胞羧肽酶A3、人末端补体复合物（SC5b-9）进行测定，对比分析实验各组生物学指标含量变化，旨在揭示非离子型造影剂过敏反应的发生机制，同时探讨流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验（basophil activation test， BAT）在非离子型造影剂过敏反应中的诊断价值。
　　方法：
　　本实验分三组，其中非离子型造影剂过敏组20例、β-内酰胺类药物过敏组40例、对照组133例（排除各种过敏性疾病、冠心病、颅脑损伤、吗啡过量等的免疫正常人）。采集EDTA抗凝与不抗凝周围静脉血各2ml。（1）取EDTA抗凝周围静脉全血80μl，采用流式细胞术和CD45/CD63/CD203c抗体组合，检测各组全血中嗜碱性粒细胞的活化情况。通过采用CD45与CD203c联合设门，从全血中筛选出嗜碱性粒细胞，再测定嗜碱性粒细胞的特异性活化标志物CD63分子的表达率。（2）取实验各组血清2ml，采用ELISA双抗夹心法测定血清中肥大细胞羧肽酶A3含量。（3）取EDTA抗凝血2ml，1500r/min离心5min，分离出上层血浆，采用ELISA双抗夹心法测定血浆中SC5b-9含量。（4）应用SPSS17.0统计学软件对所得数据进行统计描述以及统计分析。
　　结果：
　　（1）嗜碱性粒细胞CD63表达率对照组为4.07±2.43％，非离子型造影剂过敏组为18.79±21.44%，β-内酰胺类药物过敏组为22.82±26.35%。结果表明，非离子型造影剂过敏组和β-内酰胺类药物过敏组全血中嗜碱性粒细胞CD63表达率显著高于对照组（P<0.05），但非离子型造影剂过敏组与β-内酰胺类药物过敏组之间CD63表达率差异无统计学意义。（2）血清肥大细胞羧肽酶A3含量对照组为0.35±0.20 ng/ml，非离子型造影剂过敏组为1.37±0.67 ng/ml，β-内酰胺类药物过敏组为1.30±0.79 ng/ml。结果表明，非离子型造影剂过敏组和β-内酰胺类药物过敏组血清中肥大细胞羧肽酶A3含量显著高于对照组（P<0.05），但非离子型造影剂过敏组与β-内酰胺类药物过敏组之间肥大细胞羧肽酶A3含量差异无统计学意义。（3）人末端补体复合物SC5b-9含量对照组为0.13±0.05 ng/ml，非离子型造影剂过敏组为0.77±0.85 ng/ml。结果表明，非离子型造影剂过敏组血浆中SC5b-9含量显著高于对照组（P<0.05）。
　　结论：
　　（1）肥大细胞羧肽酶A3含量的增高，提示非离子型造影剂过敏反应发生过程中存在着肥大细胞的活化。（2）人末端补体复合物（SC5b-9）含量的升高，说明补体系统的激活参与了非离子型造影剂过敏反应的发生。（3）嗜碱性粒细胞CD63表达率增高，提示非离子型造影剂过敏发应发生时存在着嗜碱性粒细胞的活化；作为一种客观、安全、准确的细胞分析技术，BAT可作为非离子型造影剂和β-内酰胺类药物过敏反应的临床实验室诊断方法。

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前言

1材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 研究对象

1.1.2 主要试剂

1.1.3 主要仪器

1.2 方 法

1.2.1 标本的采集与保存

1.2.2 流式细胞术嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）

1.2.3 血清中肥大细胞羧肽酶A3含量的测定

1.2.4 血浆中SC5b-9含量的测定

1.3 统计学方法

2结 果

2.1 嗜碱性粒细胞活化试验结果

2.2 血清中肥大细胞羧肽酶A3的含量的测定

2.2.1 血清肥大细胞羧肽酶A3标准曲线

2.2.2 血清中肥大细胞羧肽酶A3的含量测定结果

2.3 血浆中人末端补体复合物SC5b-9的含量的测定

2.3.1 血浆人末端补体复合物SC5b-9标准曲线

2.3.2 血浆中人末端补体复合物SC5b-9的含量测定结果

3讨 论

3.1 非离子型造影剂过敏反应临床现状

3.2 非离子型造影剂过敏反应的发生机制

3.2.1嗜碱性粒细胞活化

3.2.2 补体系统的激活

3.2.3 肥大细胞的活化

3.3 嗜碱性粒细胞活化试验在非离子型造影剂过敏反应中的诊断价值

4结 论

参考文献

综述:流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断中的应用

致谢

在学期间承担/参与的科研课题与研究成果

个人简历