骨髓间充质干细胞源性微囊泡对软骨细胞增殖及基质合成的影响

摘要

目的：
　　(1)培养新西兰大白兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)，探索、完善分离、提取及鉴定骨髓间充质干细胞源性微囊泡(bone marrow mesenchymal stem cells-derived microvesicles, BMSCs-MVs)的系统方法；
　　(2)通过BMSCs-MVs与新西兰大白兔膝关节软骨细胞共培养，探讨BMSCs-MVs对软骨细胞增殖活性的影响；
　　(3)通过BMSCs-MVs与软骨细胞共培养，探讨BMSCs-MVs对软骨细胞的基质合成活性的影响。
　　方法：
　　(1)2月龄新西兰大白兔BMSCs的分离、培养和鉴定；
　　(2) BMSCs-MVs的分离和鉴定；
　　(3)3月龄新西兰大白兔软骨细胞的获取；
　　(4)将BMSCs-MVs加入第三代软骨细胞中共培养，利用CCK-8、EdU细胞增殖试剂检测共培养对软骨细胞增殖活性；利用RT-PCR技术研究共培养对软骨细胞基质分子合成活性的研究；
　　结果：
　　(1) CCK-8、EdU法检测BMSCs-MVs对软骨细胞增殖的影响，发现BMSCs-MVs能促进软骨细胞的增殖(P<0.01),且随BMSCs-MVs剂量增加而增加(P<0.01)；
　　(2) RT-PCR分析发现，BMSCs-MVs与软骨细胞共培养后，软骨细胞的Agg、Ⅱ型胶原的表达量增加，而Ⅹ型胶原、MMP-13、TIMP-1的表达量下降。
　　结论：
　　(1) BMSCs-MVs能够促进软骨细胞的增殖；
　　(2) BMSCs-MVs能够抑制Ⅹ型胶原和MMP-13的合成，同时促进软骨细胞合成Agg、Ⅱ型胶原，或许具有保护软骨基质、抑制软骨损害的作用。

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中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 骨髓间充质干细胞的分离和培养

1 材料与方法

2 结 果

第二部分 骨髓间充质干细胞源性微囊泡的分离、提取和鉴定

1 材料与方法

2 结 果

第三部分 新西兰大白兔关节软骨细胞的获取

1 材料与方法

2 结 果

第四部分 间充质干细胞源性微囊泡对软骨细胞增殖的影响

1 材料与方法

2 结 果

第五部分 骨髓间充质干细胞源性微囊泡对软骨细胞基质合成的影响

1 材料与方法

2 结 果

讨论

结论

参考文献

综述:间充质干细胞源性微囊泡在关节软骨损伤修复中的应用前景

致谢

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