伴AML1-ETO融合基因的急性髓系白血病患者ASXL2基因突变及临床特征分析

摘要

目的：
　　探讨伴AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病患者ASXL2突变情况；比较分析在伴AML1-ETO融合基因阳性的患者中ASXL2突变阳性与阴性患者的临床指标，评估其临床特征；筛检伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者中其它“协同分子”（包括C-Kit，FLT3，ASXL1,N/KRAS突变），明确ASXL2突变与其它“协同分子”的共存关系。
　　方法：
　　1、ASXL2基因突变分析
　　以180例初发AML患者（包括59例AML1-ETO融合基因阳性和121例阴性的AML患者）的DNA为模板，针对ASXL2基因第11、12外显子区设计引物，进行聚合酶链反应（PCR）扩增，5对引物扩增的产物经琼脂糖凝胶电泳，用凝胶成像仪扫描结合测序对结果进行分析。
　　2、伴AML1-ETO融合基因阳性ASXL2基因突变患者的临床特征分析
　　收集伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者临床各项检查指标，包括：外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白浓度、嗜酸细胞比例、骨髓原始细胞比例、免疫表型、肝、脾、淋巴结、中枢神经系统浸润、治疗缓解、生存情况等，分别对ASXL2突变阳性与阴性患者各项指标进行统计学比较分析。
　　3、伴AML1-ETO融合基因的AML患者ASXL2突变与其它“协同分子”共存关系分析
　　以59例伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者DNA为模板，分别针对ASXL1、C-Kit、FLT3、N/KRAS基因设计引物进行聚合酶链反应（PCR）扩增。ASXL1、C-Kit、FLT3-TKD、N/KRAS基因突变扩增的产物经琼脂糖凝胶电泳结合测序对结果进行分析；FLT3-ITD基因突变经聚丙烯酰胺凝胶，用凝胶成像仪对电泳结果进行扫描分析。
　　结果：
　　1、59例伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者中检出7例患者存在ASXL2突变，其突变率为11.9％（7/59），121例阴性患者中检出4例患者存在ASXL2突变，其突变率为3.3％（4/121），在伴AML1-ETO融合基因阳性和阴性患者中ASXL2突变检出率差别无统计学意义（P=0.055）。
　　2、在伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者中，ASXL2基因突变阳性患者组初诊时外周血红蛋白浓度中位数为56.2(38.0～72.0)g/L，显著低于ASXL2阴性患者组69.0(37.2～154.0) g/L，差别有统计学意义(P=0.038)；外周血白细胞、血小板、嗜酸细胞比例，骨髓原始细胞比例，与ASXL2阴性组相比，差别均无统计学意义(P>0.05)。肝、脾、中枢神经系统浸润在伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者中均未检出；淋巴结不同程度肿大，但ASXL2基因突变阳性、阴性两组间差别无统计学意义（P=0.859）。免疫表型显示：CD33在ASXL2突变阳性组中的表达与阴性组相比显著降低，两组差别有统计学意义（P=0.033）；cyCD3在两组患者中均未表达，CD117、cMPO、HLA-DR、CD34、CD38、CD13、CD44、CD15、CD64、CD11b、CD56、CD19、cyCD79a、CD7两组表达差异均无统计学意义。ASXL2突变阳性与阴性患者组治疗均达到缓解，两组差别无统计学意义(P=0.577)。ASXL2突变阳性患者组中位生存时间8.0(6.0～28.0)月低于阴性患者组22.0(0.0～54.0)月，但两组间差别无统计学意义（P=0.631）。
　　3、58例伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者：2例患者ASXL2突变单独存在；ASXL2基因突变阳性组未检出ASXL1基因突变；ASXL2和ASXL1基因突变阳性与阴性患者组相比C-Kit、FLT3、RAS基因突变检出率差别均无统计学意义(P>0.05)；C-Kit基因突变患者中未检出RAS基因突变。
　　结论：
　　1、ASXL2突变可能是伴AML1-ETO融合基因阳性AML患者发病的一种新的“协同分子”，其在中国伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者中突变率低于西方人群。伴AML1-ETO融合基因阴性AML患者也发现ASXL2突变的存在，提示ASXL2突变并非特异性存在于AML1-ETO融合基因阳性的AML患者。
　　2、ASXL2基因突变阳性与阴性患者组比较，ASXL2突变阳性患者外周血红蛋白浓度和CD33表达方面明显降低，呈现一定的临床特征。
　　3、ASXL2和ASXL1为同源基因，具有同样的生物学功能，那么突变可能具备其一即可。伴AML1-ETO融合基因阳性的AML患者可能具备ASXL2和ASXL1、C-Kit、FLT3、N/KRAS四大类基因其一就能导致白血病的发生。