CNOT7基因参与诱导HepG2细胞对Vγ9Vδ2T细胞的免疫耐受

摘要

目的：
　　研究人CCR4-NOT转录复合体亚基7（CCR4-NOT transcription complex subunit7 human，CNOT7）在HepG2肝癌细胞系(Hepatoblastoma G2 Cell Line，HepG2 Cells)对Vγ9Vδ2T淋巴细胞免疫耐受中的作用及相关机制。
　　方法：
　　1.用CNOT7重组质粒（Recombinant plasmid of CNOT，shCNOT7）及相应对照组载体质粒转染HepG2细胞。
　　2.用Vγ9Vδ2T细胞因子干预转染前后的各组细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡水平。
　　3. Western blot方法检测各组细胞中CNOT7及信号传导及转录激活因子1（Signal Transducer and Activator of Transcription1，STAT1）、STAT3的蛋白表达水平。
　　4. Western blot法检测HepG2肝癌细胞系及人正常肝细胞系L02中CNOT7、STAT1和STAT3蛋白的表达水平。
　　结果：
　　1.使用Vγ9Vδ2T细胞因子干预后，CNOT7基因敲减后的HepG2细胞组凋亡率由(7.55±2.63)％增加至(20.59±3.12)％。
　　2.与L02细胞组比较，HepG2细胞组中的CNOT7蛋白高表达（F=28.76，P<0.01），STAT3蛋白高表达（F=110.29，P<0.01），STAT1蛋白低表达（F=35.67，P<0.01）。
　　3. CNOT7基因敲除后，HepG2细胞组的STAT1蛋白表达上调(t=6.69，P<0.05)。
　　结论：
　　1. CNOT7基因参与诱导了HepG2细胞对Vγ9Vδ2T细胞的免疫耐受，这与CNOT7和STAT3的过表达和STAT1的表达抑制相关联。
　　2.敲减 CNOT7基因可以通过上调 STAT1蛋白的表达从而逆转 HepG2细胞对Vγ9Vδ2T细胞的免疫耐受。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1材料与方法

1.1 实验材料

1.2方法

1.3统计学分析

2结 果

2.1 Vγ9Vδ2T细胞对HepG2细胞的杀伤能力的变化

2.2 HepG2细胞系中CNOT7、STAT1 及STAT3蛋白的表达水平

2.3敲减CNOT7基因后HepG2细胞系中CNOT7、STAT1及STAT3蛋白质表达水平的变化

3讨论

3.1 HepG2肝癌细胞系对Vγ9Vδ2T细胞存在明显的免疫耐受

3.3 HepG2肝癌细胞系中CNOT7及STAT3的蛋白表达水平上调，STAT1蛋白表达水平下调

3.4敲减CNOT7基因可以上调STAT1蛋白的表达，过表达CNOT7基因可以下调STAT1蛋白的表达

4结论

参考文献

综述:CCR4-NOT在细胞质mRNA脱腺苷化过程中作用的研究进展

致谢

个人简历