几种免疫增强剂对花鲈非特异性免疫力的影响及免疫疲劳初探

摘要

本文以花鲈(LateoJabrax japonicus)作为实验材料，探讨了复合微生态制剂、肽聚糖及褐藻酸钾等几种免疫增强剂对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响以及免疫疲劳现象。研究内容主要包括：(1)复合微生态制剂对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响；(2)肽聚糖对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响；(3)褐藻酸钾对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响；(4)花鲈免疫疲劳初探。研究结果如下。 将复合微生态制剂分别以0(control)、500mg/kg(PR-500)和3000mg/kg(PR-3000)的添加量加入到花鲈基础饲料中，在饲喂42d和84d后分别取样，以花鲈肝脏酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)，血清溶菌酶活力、替代补体活力(ACH<,50>)以及头肾巨噬细胞杀菌力和呼吸爆发活力为判据，确定微生态制剂对花鲈非特异性免疫力的影响；用鳗弧菌Vibrio anguillarum对饲喂84d后的花鲈进行攻毒实验，测定累积死亡率，以确定微生态制剂对花鲈抗病力的影响。实验结果表明，复合微生态制剂的添加未对花鲈肝脏的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力产生积极影响。饲喂至84d时，PR-500与PR-3000组花鲈的溶菌酶活力与攻毒后的累积死亡率显著低于对照组(P<0.05)，头肾巨噬细胞数量及PR-3000组花鲈的巨噬细胞杀菌力皆显著高于对照组(P<0.05)。 将A3α肽聚糖分别以0(control)、100mg/kg(PG-100)、500mg/kg(PG-500)的添加量加入到花鲈基础饲料中，在饲喂42d和84d后分别取样。84d后用鳗弧菌对花鲈进行攻毒实验，测定累积死亡率。实验结果：42d时测得PG-100组与PG-500组花鲈肝脏酸性磷酸酶(ACP)活力与对照组相比无显著变化(P>0.05)，碱性磷酸酶(AKP)活性活性显著降低(P<0.05)，PG-500组的超氧化物歧化酶(SOD)活力显著高于对照组(P<0.05)。84d时测得，二肽聚糖添加组的碱性磷酸酶活力，头肾巨噬细胞杀菌力与对照组间无显著性差异，PG-100组的血清溶菌酶活力显著低于对照组(P<0.05)，二肽聚糖添加组的替代补体活力及PG-500组的呼吸爆发活力皆显著低于对照组(P<0.05)。攻毒后46h后各组间累积死亡率无显著性差异(P>0.05)。将褐藻酸钾分别以0(control)、1000mg/kg(A1-1000)、5000mg/kg(A1-5000)的添加量加入到花鲈基础饲料中，在饲喂42d和84d时取样分析，之后用鳗弧菌对饲喂84d后的花鲈进行攻毒实验，测定累积死亡率，以确定微生态制剂对花鲈抗病力的影响。结果饲喂42d时，花鲈肝脏的酸性磷酸酶(ACP)活力，碱性磷酸酶(AKP)活力显著低于对照组(P<0.05)，Al-1000组的超氧化物歧化酶活力显著高于对照组(P<0.05)。84d时测得褐藻酸钾添加组花鲈的特定生长率与对照组间无显著性差异(P>0.05)；酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活力皆显著高于对照组，超氧化物歧化酶活力、血清替代补体活力与对照组间无显著性差异(P>0.05)。Al-5000组的巨噬细胞杀菌力及呼吸爆发活力皆显著高于对照组。攻毒后Al-1000与Al-5000组的累积死亡率皆显著低于对照组(P<0.05)。 以28.5±2.2g的花鲈作为实验材料，以酸性磷酸酶，超氧化物歧化酶，溶菌酶，血清替代补体活力，累积死亡率为判据，比较了连续60d饲喂含500mg/kg肽聚糖(control组)饲料的花鲈与另外两组(PG-Vc组：前30d饲喂含500mg/kg肽聚糖的饲料，后30d 饲喂含4g/kg维生素C的饲料；PG-G1组：前30d饲喂含500mg/kg肽聚糖的饲料，后30d饲喂含4g/kgβ-1，3-D-葡聚糖的饲料)花鲈的免疫反应特点，初步探究了免疫疲劳现象及免疫疲劳缓解方法。饲喂前30d，花鲈肝脏的酸性磷酸酶(ACP)活力，超氧化物歧化酶(SOD)酶活力及血清替代补体活力水平皆呈现先上升后下降趋势，出现免疫疲劳。后30d所测结果：PG-Vc组花鲈肝脏的酸性磷酸酶活力与血清替代补体活力水平皆显著高于对照组(P<0.05)，两实验组的SOD酶活力与溶菌酶活力水平亦显著高于对照组(P<0.05)。攻毒后两实验组的花鲈累积死亡率皆显著低于对照组(P<0.05)。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一章 鱼类免疫增强剂的研究现状

1 鱼类免疫增强剂的含义及作用机理

1.1 含义

1.2 作用机理

2 鱼类免疫增强剂的种类

2.1 人工合成的免疫增强剂

2.2 微生物来源的免疫增强剂

2.3 动植物来源的免疫增强剂

2.4 生物活性因子类免疫增强剂

2.5 营养素类免疫增强剂

3 鱼类免疫增强剂的评价方法

4 鱼类免疫增强剂的研究方向

4.1 免疫增强剂的给予时间和周期

4.2 免疫增强剂的给予途径和剂量

4.3 加强对鱼类免疫增强剂作用机理的研究

参考文献

第二章 复合微生态制剂对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响

1 材料和方法

1.1 实验饲料的制备

1.2 花鲈的饲养

1.3 取样

1.4 测定方法

1.5 攻毒实验

1.6 统计分析

2 实验结果

2.1 生长

2.2 鲈肝酸性磷酸酶，碱性磷酸酶及过氧化物歧化酶活力

2.3 血清溶菌酶活力

2.4 替代补体活力

2.5 头肾巨噬细胞数量、杀菌力及呼吸爆发活力

2.6 攻毒实验结果

3 讨论

参考文献

第三章 肽聚糖对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响

1 材料和方法

1.1 实验饲料的制备

1.2 花鲈的饲养

1.3 取样

1.4 测定方法

1.5 攻毒实验

1.6 统计分析

2 实验结果

2.1 血清溶菌酶活力、替代补体活力及头肾巨噬细胞杀菌力和呼吸爆发活力

2.2 肝脏超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶及碱性磷酸酶活力

2.3 生长

2.4 攻毒实验结果

3 讨论

参考文献

第四章 褐藻酸钾对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响

1 材料和方法

1.1 实验饲料的制备

1.2 花鲈的饲养

1.3 取样

1.4 测定方法

1.5 攻毒实验

1.6 统计分析

2 实验结果

2.1 血清溶菌酶活力、替代补体活力及头肾巨噬细胞杀菌力和呼吸爆发活力

2.2 肝脏超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶及碱性磷酸酶活力

2.3 生长

2.4 攻毒实验

3 讨论

参考文献

第五章 花鲈免疫疲劳现象初探

1 材料和方法

1.1 实验饲料的制备

1.2 花鲈的饲养

1.3 取样

1.4 测定方法

1.5 攻毒实验

1.6 统计分析

2 实验结果

2.1 花鲈肝脏酸性磷酸酶，碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力

2.2 血清溶菌酶活力

2.3 替代补体活力

2.4 攻毒实验结果

3 讨论

参考文献

致谢