形态标记与AFLP分子标记在“黄海一号”中国对虾遗传选育应用中的初步研究

摘要

通过遗传改良提高中国对虾的生长、抗病力等经济性状是对虾养殖的主要突破点。形态学标记(Morphological marker)具有易于识别和掌握、简单直观等优点，在遗传研究和品种选育上有重要的应用价值。分子标记(Molecular marker)突破了表现型的局限性，具有稳定性高、受环境条件的影响较小、信息含量高等特点。 “黄海1号”是2004年经国家水产原良种审定委员会审定的中国对虾养殖新品种，但对其体型特征尚未作过系统研究。选取120尾第八代“黄海一号”中国对虾，测量其体长等13个数量性状指标，计算相关系数，采用通径分析的方法计算了以。“黄海一号”中国对虾各个性状为自变量，体重作依变量的通径系数及相关指数。结果表明，体重和第一、六腹节长和头胸甲长、宽等性状的相关系数全部达到极显著(P<0.01)；头胸甲长对体重的直接作用最大，是影响中国对虾体重的主要因素；其他性状对体重的直接影响较小，主要通过其他性状进行间接影响。多元回归分析建立了体长、第一腹节长、尾节长和第一腹节高等性状对体重的回归方程为：y=-79.269+0.840xl+17.725x2+3.510x3+3.713x4+7.442x5。回归分析、相关分析和通径分析结果表明，头胸甲长是影响体重的最关键因素，为中国对虾选种提供了理论依据和理想的测度指标。 在以“黄海一号”中国对虾为试材，优化AFLP技术体系及集群分离分析的研究中，对AFLP分子标记技术从引物的筛选、PCR反应条件等方面进行了优化，优化后的体系稳定、快捷、灵敏。按照改进的技术体系，利用11对AFLP引物组合检测了“黄海一号”中国对虾第8代选育群体基因组DNA的多态性，结果表明，AFLP标记表现出较高的多态检测效率，11对引物共产生700余条带，平均每对引物组合检测到20.8个多态标记。同时，进行分子标记与经济性状的相关分析，研究结果表明，3个AFLP标记与体长存在显著相关，这些AFLP标记的研究为中国对虾的分子标记辅助选择提供了理论参考，为进一步将与经济性状有关的基因进行定位、克隆奠定了基础。

目录

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第一章 文献综述

第二章中国对虾“黄海1号”第八代选育群体几个主要数量性状的相互关系研究

0 引言

1材料与方法

1.1实验材料

1.2形态指标及测量

1.3统计分析方法

2结果与分析

2.1各性状的表型参数估计值(统计量)

2.2各性状间的相关系数

2.3多元回归方程的建立

3讨论

3.1回归方程

3.2各性状的通径分析

3.3影响中国对虾“黄海一号”体重的主要数量性状的确定

第三章中国对虾“黄海一号”AFLP分析的条件优化

0 引言

1材料与方法

1.1试验材料

1.2主要溶液配制

1.3实验方法

2结果与讨论

2.1高质量模板DNA的提取

2.2模板DNA的酶切

2.3 PCR体系建立

第四章“黄海一号”中国对虾生长相关分子标记的初步筛选

1材料与方法

1.1试验材料

1.2数据测量与统计分析

1.3基因组DNA提取

1.4 AFLP反应体系及扩增程序

1.5 AFLP分析

1.6特异片段的回收及再扩增

2结果

2.1表形性状统计分析

2.2 AFLP引物的筛选

2.3 AFLP多态标记检测结果

2.4生长相关分子标记

2.5生长相关分子标记的回收克隆及测序结果

3讨论：

参考文献

致谢