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0前言
1鱼类疾病与防治
1.1感染鱼类的疾病种类
1.2牙鲆养殖及病害防治
2 DNA疫苗在水产养殖中的应用
2.1 DNA疫苗的发展
2.2鱼用DNA疫苗的构建
2.3核酸疫苗产品的质量控制
2.4鱼类DNA疫苗的应用效果
3疫苗免疫途径研究进展
3.1鱼用疫苗接种方法
3.2疫苗微胶囊化技术平台
3.3微球胶囊化技术
3.4微胶囊疫苗的释放
3.5口服疫苗接种传递系统
3.6存在问题和发展趋势
4牙鲆淋巴囊肿病研究现状
5鱼用核酸疫苗研究目的及展望
参考文献
1核酸疫苗的制备及纯化
引言
1材料与方法
1.1菌种和质粒
1.2工具酶及试剂
1.3重组真核表达载体的构建
1.4细菌小量培养
1.5细菌大量培养
1.6质粒DNA少量快速提取
1.7内毒素的清除
1.8内毒素的检测
1.9 DNA酶切反应
1.10质粒DNA的纯度测定
2结果与讨论
2.1内毒素的清除和鉴定
2.2重组子(pEGFP-N2-LCDV-cn-MCP0.6kb)酶切鉴定
2淋巴囊肿病毒海藻酸盐口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究
摘要
1引言
2材料与方法
2.1材料
2.2核酸疫苗(pDNA)的制备
2.3海藻酸盐微球的制备工艺(载核酸疫苗)
2.4微球特征的检测
2.5包被在微球中超螺旋结构的百分比的检测
2.6微囊核酸疫苗的口服管理
2.7 RT-PCR检测
2.8绿色免疫荧光蛋白检测(GFP immunofluorescence)
2.9病毒的分离和纯化
2.10间接法酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)
3结果与讨论
3.1海藻酸盐微囊核酸疫苗的特征
3.2胃肠模拟条件下pDNA释放
3.3载核酸疫苗海藻酸盐微曩的红外光谱分析
3.4超螺旋质粒的检测
3.5 RT-PCR分析
3.6绿色荧光蛋白(GFP)的检测
3.7鱼对淋巴囊肿病毒(LCDV)的体液免疫响应
4结论
参考文献
3 淋巴囊肿病毒聚丙交酯乙二酸(PLGA)口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究
摘要
1引言
2材料和方法
2.1聚合物及其他试剂
2.2核酸疫苗的制备工艺
2.3水包油包水(W/O/W)复乳法微囊的体的合成
2.4微囊体特征的检测
2.5质粒(pDNA)完整的估计
2.6动物口服程序
2.7 RT-PCR检测
2.8病毒的分离与纯化
2.9 MCP的表达与免疫荧光检测
2.10酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)
3实验结果
3.1载核酸疫苗微囊体的特征
3.2 PLGA微囊体中质粒疫苗完整性分析
3.3 RT-PCR分析
3.4绿色荧光蛋白的检测
3.5鱼对LCDV的体液免疫响应
4讨论
5结论
参考文献
4淋巴囊肿病毒壳聚糖口服微囊核酸疫苗的研制和免疫效果研究
摘要
1引言
2材料和方法
2.1聚合物和试剂
2.2核酸疫苗的制备
2.3油包水乳化法微球的制备方法
2.4载疫苗微球特征
2.5包被前后质粒疫苗的完整性
2.6壳聚糖微囊中的体外释放
2.7动物口服程序
2.8 RT-PCR检测
2.9 MCP的表达与免疫荧光检测
2.10病毒的分离与纯化
2.11酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)
2.12数据分析
3结果
3.1壳聚糖微囊的特征
3.2载药壳聚糖微囊中核酸疫苗完整性的检测
3.3载药壳聚糖微囊中核酸疫苗的体外释放试验
3.4 MCP基因表达的RT-PCR分析
3.5绿色荧光蛋白的检测
3.6鱼对淋巴囊肿病毒(LCDV)的体液免疫响应
4讨论
5结论
参考文献
论文结论
本论文的创新点:
附录
致谢
个人简历
发表的学术论文
中国海洋大学;