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骨碎补提取液对体外培养兔骨髓基质细胞向成骨细胞分化影响的实验研究

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引 言

材料与方法

一、实验材料

(一)主要设备及仪器

(二)主要试剂

(三)实验动物

二、骨碎补醇提液的提取过程

三、培养液的配制

四、骨髓基质细胞的原代培养

五、骨髓基质细胞的传代培养

六、实验分组

七、组织形态学观察

(一)倒置相差显微镜逐日观察

(二)扫描电镜观察(Scanning Electron Microscope,SEM)

八、细胞表型鉴定

(一)碱性磷酸酶染色

(二)Ⅰ型胶原免疫组织化学染色

(三)钙结节染色

九、统计学方法

实验结果

一、倒置相差显微镜观察结果

二、碱性磷酸酶染色结果

三、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色结果

四、钙结节染色结果

五、扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)观察结果

讨 论

一、骨髓基质细胞

(一)骨髓的成骨能力

(二)骨髓基质细胞概念

(三)骨髓基质细胞的成骨特性

二、祖国医学对骨髓与骨关系的认识

三、骨碎补的功效和现代药理研究

四、骨髓基质细胞的原代培养及鉴定

五、不同浓度的骨碎补醇提液对骨髓基质细胞成骨分化的影响

结语

参考文献

综 述 中药促进骨折愈合机理在分子生物学水平上的研究概况

附 录

致 谢

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摘要

目的:观察骨碎补提取液能否促进体外培养的骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)向成骨细胞分化,初步探讨骨碎补促进骨折愈合、防治骨质疏松可能的一种细胞学机制.方法:用不同浓度的骨碎补醇提液对骨髓基质细胞持续培养,通过倒置相差显微镜、扫描电镜、组织化学染色、钙染色等手段对所培养细胞进行形态学和组织学观察,同时与标准培养液及成骨条件诱导培养液持续培养的细胞进行对比研究.结论:中药骨碎补的醇提取液能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,对骨髓基质细胞的这种作用可能是其促进骨质愈合、预防治疗骨质疏松的一种细胞学机制.

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