不同浓度泡球蚴囊液干预对大鼠肝星状细胞TGF-β1、IL-6、TNF-α表达的影响

摘要

目的：研究泡球蚴囊液刺激环境对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）TGF-β1、IL-6、TNF-α表达的影响。
　　方法：用浓度分别为0、0.01、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.9、1.7、3.4、6.8、13.5mg/ml的泡球蚴囊液与大鼠HSC-T6细胞共培养24 h，0mg/ml浓度组做空白对照。ELISA法(酶联免疫吸附测定法)检测各浓度泡球蚴囊液处理组转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达变化。
　　结果：TGF-β1的表达在泡球蚴囊液浓度为0.01～6.8mg/ml范围内略高于空白对照组，但差异无统计学意义；泡球蚴囊液浓度高于3.4mg/ml时，IL-6的表达极显著增加（P<0.01），其中6.8、13.5mg/ml泡球蚴囊液处理组相比空白对照组分别增加3028.65、3879.23倍；泡球蚴囊液浓度≤0.2mg/ml时，TNF-α的表达趋于平稳；此后急剧增加又逐渐下降，其中泡球蚴囊液浓度为0.4mg/ml时TNF-α的表达量达到最大，为空白对照组的3.53倍，差异具统计学意义（P<0.05）。
　　结论：泡球蚴囊液对大鼠HSC-T6细胞TGFβ1无明显的刺激分泌作用；高浓度的泡球蚴囊液可刺激大鼠HSC-T6细胞IL-6的表达分泌；一定浓度的泡球蚴囊液可刺激HSC-T6细胞TNF-α分泌。

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目录

第一章 引言

第二章 实验材料与实验方法

2.1 实验材料及仪器

2.1.1 实验材料

2.1.2主要仪器

2.1.3 主要试剂

2.2 实验方法

2.2.1试剂配制

2.2.2 HSC-T6细胞培养基本操作方法

2.2.3 HSC-T6细胞油红O染色

2.2.4 HSC-T6细胞Vitamin A脂滴荧光观察

2.2.5 BCA（二辛可宁酸）法测定泡球蚴囊液中水溶性蛋白浓度

2.2.6 ELISA实验步骤

2.2.7 技术路线图

2.2.8 统计学处理

第三章 结 果

3.1 HSC-T6细胞培养传代的形态学特征基本情况

3.2 HSC-T6细胞鉴定

3.2.1 HSC-T6细胞脂肪滴油红O染色

3.2.2 HSC-T6细胞Vitamin A脂滴紫外激发的自发荧光

3.3 ELISA实验TGF-β1、IL-6、TNF-α测定结果

3.3.1 TGFβ1标准品曲线及方程

3.3.2 IL-6标准品曲线及方程

3.3.3 TNF-α标准品曲线及方程

3.3.4不同浓度泡球蚴囊液干预对大鼠HSC-T6 细胞TGFβ1表达的影响

3.3.5不同浓度泡球蚴囊液干预对大鼠HSC-T6 细胞IL-6表达的影响

3.3.6不同浓度泡球蚴囊液干预对大鼠HSC-T6 细胞TNF-α表达的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢

附录

作者简历