柄海鞘（Styela clava）活性物质的结构解析及生物活性研究

摘要

该文从以下几个方面对柄海鞘生理活性物质进行了初步的研究.首先,将柄海鞘的鞘体和鞘囊进行精细剥离,避免了物质的相互干扰,更好的进行物质的定位.实验中,我们单独对柄海鞘鞘体中的化学成分进行研究.按照目前比较常用的天然产物提取分离方法,将样品冷冻干燥后,用甲醇:甲苯(3:1)浸泡,收集滤液,减压蒸馏得到的浓缩液用NaNO<,3>水溶液萃取,收集水相,减压浓缩至NaNO<,3>晶体析出.用氯仿反复浸泡NaNO<,3>晶体,收集氯仿浸提液,减压浓缩,得红棕色浸膏状鞘体粗提物.采用硅胶湿柱层析,用氯仿作展开剂和洗脱液,反复硅胶层析,对柄海鞘鞘体粗提物进行分离、提取与纯化,利用高效液相色谱检测,得到混合组分F Ⅰ.其次,采用气相-质谱联用(GC-MS)技术,对FⅠ进行成分分析和结构解析,结果表明FⅠ的主成分为化合物1.2-双(5-甲基-2-苯并恶唑)-乙烯.最后,利用细胞培养技术对FⅠ进行抗肿瘤活性和免疫调节活性的研究.我们研究了FⅠ对癌细胞活性的影响,通过MTT法初步检验了其对癌细胞活性的抑制作用.实验结果表明,对于BEL-7402肝癌细胞,FⅠ在不同作用时间和不同浓度对其活性均有不同程度的抑制作用,作用时间为48h,浓度为60μg/ml时作用最为显著.但是对于BGC-823胃癌细胞,FⅠ仅在60μg/ml浓度下对其活性有抑制作用.对正常小鼠脾脏细胞进行体外培养,研究FⅠ的免疫调节活性,实验表明,FⅠ对淋巴细胞增殖和培养细胞上清液中IL2、IL-6的活性均无显著影响.相信,通过进一步的研究,必然会推进中国在此领域天然产物研究与开发的进度,开创海鞘生理活性物质研究的新局面.

目录

前言

独创声明

综述

第一部分海鞘生理活性物质的研究进展

1、物质活性

2、物质结构

第二部分海鞘生理活性物质的提取、分离和纯化

实验

第一部分柄海鞘鞘体生理活性物质的提取、分离、纯化

1、实验材料

2、实验仪器和试剂

3、实验方法和步骤

4、实验结果

5、其它说明

第二部分柄海鞘鞘体F I的成分分析

1、实验材料

2、实验仪器和试剂

3、实验方法和步骤

4、实验结果

第三部分F I抗肿瘤生理活性检验

1、实验材料

2、实验仪器和试剂

3、实验方法和步骤

4、实验结果

第四部分 F Ⅰ对小鼠脾脏细胞增殖的影响

1、实验材料

2、实验仪器和试剂

3、实验方法与步骤

4、实验结果

第五部分 FⅠ对小鼠脾脏细胞细胞因子分泌的影响

1、实验材料

2、实验仪器和试剂

3、实验方法与步骤

4、实验结果

讨论

结论

参考文献

发表文章

致谢