唐古特白刺果多糖与黑果枸杞多糖对免疫受抑小鼠IFN-γ及T/NK细胞的影响

摘要

近年来，大量的研究表明唐古特白刺果（NitrariatangutorumBobr.NTB）多糖及黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr.LRM）多糖具有多种生理功能。但其对T/NK细胞免疫功能的影响尚不清楚。本研究以唐古特白刺果及黑果枸杞为主要原料，采用超声-微波协同提取方法提取了多糖，研究了该两种多糖对小鼠IFN-γ及T/NK细胞免疫调节的作用。
　　方法：
　　（1）采用超声-微波协同提取的办法提取了唐古特白刺果及黑果枸杞多糖含量分别为47.78％和35.90%。
　　（2）动物分组：昆明种小鼠40只，雌雄各半；随机分为4组，每组10只，组别为：正常对照组、模型组、模型+NTB多糖组和模型+LRM多糖组。
　　（3）免疫受抑模型建立；免疫受抑组腹腔注射环磷酰胺（cyclophosphamide，CPM）70mg/kg连续5天造模。
　　(4)NTB多糖及LRM多糖注射：免疫受抑组造模成功后腹腔注射NTB及LRM多糖3.6g/kg[13]连续10天。正常对照组腹腔注射同等量生理盐水。末次给药24h后断颈采血，称取脾脏和胸腺重量，取外周血测定CD3、CD4、CD8、NK(CD49b)及血清IFN-γ的测定。
　　（5）小鼠免疫功能的检测：
　　a.脾脏、胸腺重量（指数）及脾脏组织结构观察；
　　b. RT-PCR检测小鼠脾细胞IFN-γmRNA数值；
　　c.ELISA法检测小鼠血清IFN-γ的含量；
　　d.流式细胞术检测小鼠外周血中细胞亚群CD3、CD4、CD8及NK细胞百分比
　　结果：
　　模型组与模型+NTB多糖组及模型+LRM组脾脏、胸腺重量增加，模型组淋巴滤泡消失，NTB多糖及LRM多糖组淋巴滤泡趋于正常，血清中IFN-γ的含量显著增加(P＜0.05)，IFN-γ的表达亦增强(P＜0.05)；流式细胞术检测T细胞亚群及NK细胞的显示CD3、CD4、CD8、NK细胞均有不同程度的增加，其显著性分别为(P＜0.05)、(P＜0.01)、(P＜0.05)、(P＜0.05)；结论：NTB多糖及LRM多糖能够明显增强免疫受抑小鼠的IFN-γ含量，增加CD3、CD4、CD8、NK(CD49b)细胞的数量，淋巴细胞数量增多。

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引言

第一章 超声-微波协同提取唐古特白刺果多糖与黑果枸杞多糖

1.1 材料与方法

1.2 实验方法

1.3 结果 NTB多糖与LRM多糖得率及含量

1.4 小结

第二章 NTB多糖与LRM多糖对免疫受抑小鼠IFN-γ、T/NK细胞的影响

2.1 实验材料

2.2 实验动物及分组

2.3 小鼠脾脏、胸腺重量及组织结构观察察

2.4 小鼠脾细胞IFN-γ提取

2.5 小鼠血清IFN-γ的测定

2.6 T/NK细胞亚群分析

2.7 数据处理

2.8 结果

第三章 讨论

3.1 免疫抑制低下动物模型的建立

3.2 NTB多糖与LRM多糖对免疫受抑小鼠免疫调节作用

3.3 结论

参考文献

综述:唐古特白刺果及黑果枸杞生物活性研究进展

一 唐古特白刺果研究现状

二 黑果枸杞研究现状

三 多糖研究现状

四 T/NK细胞研究现状

参考文献

致谢

攻读研究生期间取得的研究成果

作者简历