宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠的抗衰老作用研究

摘要

目的：衰老是随着年龄的增加，机体各器官系统均发生退行性变化，是机体生理、病理过程和生化反应的综合体现。衰老相关的大脑退行性改变是大脑生长发育成熟之后走向老化过程的正常生理现象，记忆和学习能力下降是大脑中枢神经系统衰老退变的主要临床表现。枸杞子是传统中药材，为中医补脾益肺、温肾滋阴药物，具有延缓衰老的作用。无果枸杞芽是枸杞类新品种，其提取物中的生物活性物质含量明显高于普通的枸杞叶、果及其它植物。本文旨在观察宁夏无果枸杞芽提取物（FLE）对自然衰老小鼠认知功能、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性、丙二醛（MDA）含量及FOXO1、β-catenin表达的影响，为探讨其可能的抗衰老作用和机制提供实验室依据。
　　方法：将80只15月龄自然衰老KM小鼠分为老年对照组和老年FLE低剂量组（FLE1组）、老年FLE中剂量组（F LE2组）、老年FLE高剂量组（FLE3组），每组20只；另将20只3月龄KM小鼠作为青年对照组。FLE1组、FLE2组，FLE3组分别用质量/体积百分比为5％、10%、20%FLE灌胃，0.2mL/（10g·d）)，老年对照组和青年对照组取等量生理盐水灌胃，连续8周。用Morris水迷宫实验和跳台实验评价 FLE对自然衰老小鼠学习记忆能力变化的影响；黄嘌呤氧化酶法测定脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性，DNTB法测脑组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性，硫代巴比妥酸法测定脑组织MDA水平；应用尼氏染色观察FLE对自然衰老小鼠海马CA2区神经元密度的影响；免疫荧光法检测FLE对自然衰老小鼠齿状回BrdU标记神经细胞增殖的影响;普通RT-PCR及实时荧光定量PCR法检测小鼠脑组织中FOXO1、β-catenin mRNA的表达;免疫组化法及West-blot法检测小鼠脑组织中FOXO1、β-catenin的蛋白表达。
　　结果：使用不同浓度 FLE喂养自然衰老小鼠8周后，无果枸杞芽提取物老年高剂量（FLE3）组，无果枸杞芽提取物老年中剂量（FLE2）组可改善自然衰老小鼠与年龄相关的行为学变化，提高自然衰老小鼠的学习、记忆能力，改善因衰老而引起的海马CA2区神经元密度的降低，尼氏小体的减少，提高脑齿状回细胞增殖率；提高自然衰老小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性，降低丙二醛（MDA）含量,作用与FLE浓度呈正相关的趋势；PCR法检测显示FLE3组，FLE2组小鼠脑组织中FOXO1、β-catenin的mRNA表达增加，免疫组化及West-blot检测显示FLE3组，FLE2组小鼠脑组织中FOXO1、β-catenin的蛋白表达增加,并且其与无果枸杞芽抗氧化应激的能力具有一致性。
　　结论：自然衰老小鼠的学习记忆能力下降，与海马神经细胞增殖能力、脑组织抗氧化能力下降等因素有关。中、高浓度的FLE可以改善自然衰老小鼠的学习记忆能力、提高海马齿状回神经细胞增殖率、增强脑组织T-SOD,GSH-PX活性，降低MDA含量，具有抗衰老作用。中、高浓度的FLE可上调脑组织FOXO1、β-catenin的mRNA和蛋白表达，并且与其对脑组织抗氧化能力影响相一致，初步推断FLE抗衰老的分子学机制可能与其上调FOXO1、β-catenin表达，进而抑制机体组织细胞的氧化应激损伤有关。

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前言

前言参考文献

实验一 宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠认知能力的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验二 宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠海马神经细胞增殖及脑内SOD, GSH-PX活性及MDA含量的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验三 宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠脑组织FOXO1，β-cate nin表达的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

结论

附图

综述

综述参考文献

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