猪支原体肺炎商品化疫苗免疫效果评估

摘要

猪支原体肺炎(MPS)是猪的一种慢性呼吸道传染性疾病，其病原体为猪肺炎支原体(Mhp)，以发病猪咳嗽、气喘为特征，故又称之为猪气喘病，是造成养猪业严重经济损失的猪的主要传染病之一。对于该病的防治措施主要通过抗菌药物的应用以及疫苗的免疫，但由于Mhp易产生耐药性，所以应用疫苗免疫是目前防控该病的主要发展方向。市场上使用的MPS疫苗，大部分为全菌体疫苗，包括弱毒活疫苗和灭活疫苗。其中灭活疫苗免疫方式为肌肉注射，弱毒活疫苗则需要通过胸腔注射、肺内注射或滴鼻。在我国，猪支原体肺炎灭活疫苗多为进口产品，价格较昂贵；国内研制的灭活疫苗产品多为油包水型，安全性较差；国内自主研发生产的弱毒活疫苗，免疫效果较好，且成本较为低廉，但某些疫苗产品需要通过胸腔或者肺内注射免疫，操作难度较高，不利于推广。 目前商品化的猪支原体肺炎疫苗种类繁多，不同疫苗产品之间的免疫效果差异较大，如何选择安全可靠且效果优良的猪支原体肺炎疫苗，是猪场急需解决的问题。本研究选取三家疫苗公司的四种MPS疫苗产品：甲公司灭活苗、乙公司灭活苗、丙公司灭活苗以及弱毒活苗。其中甲、乙公司为国外企业，丙公司为国内企业。挑选50头10日龄健康仔猪，每组10头分为5组，按照疫苗说明书分别免疫相应疫苗产品：A组(甲公司灭活苗)、B组(乙公司灭活苗)、C组(丙公司活苗)、D组(丙公司灭活苗和活苗共同免疫)、E组(空白对照组)。在免疫当天观察猪群的整体状态，然后在疫苗免疫后的3d、30d、90d，每组随机选取5头，进行鼻拭子和血液采集，进行呼吸道病原检测、应激相关激素水平检测和有关疾病的抗体检测。待猪群出栏屠宰时，再次采集血液以及整个肺脏，进行Mhp病原检测、抗体检测、肺脏眼观病变评分以及镜检评分。 试验结果显示：对各组猪群平均增重进行比对，其中D组增重最好，平均日增重0.615Kg，出栏平均体重110.663Kg，A组和空白对照组增重最差，平均日增重分别为0.509Kg、0.506Kg，出栏平均体重分别为91.618Kg、91.06Kg；对肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)以及皮质醇激素(COR)等应激相关激素水平进行检测，发现B组产生的应激相关激素水平较低，对猪群应激反应较小，D组产生的应激相关激素水平较高，对猪群应激反应较大。但从猪群整体情况来看，各组疫苗免疫后猪群精神状态、采食量、饮水量均未见明显的异常表现，说明各组疫苗免疫仅对猪群产生较小的免疫应激反应；对Mhp病原进行检测，结果显示，B、C、D组阳性率较低，为28.57%，A组和空白组阳性率较高，为50%；对Mhp抗体水平进行检测，其中C、D组抗体阳性率较高，D组抗体水平最高，A组未产生抗体；对肺脏眼观病变进行评分，D组病变程度最轻，为32.49%，A组和空白组病变程度较重，分别为45%、47.25%；对肺脏镜检病变进行评分，D组病变程度最低，为38分，A组和空白组病变程度较高，分别为56分、59分；呼吸道病原检测，主要对传染性胸膜肺炎(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪肺疫(PM)细菌进行检测，结果仅在疫苗免疫后30d各组均检测到HPS阳性，其他阶段各病原皆为阴性；将各阶段采集到的血清同时进行CSFV、PRRSV、PRV gE、PCV2的抗体检测，分析Mhp疫苗免疫对其他疫苗免疫是否会产生影响。结果发现每组在各阶段的平均抗体水平差异不显著，说明Mhp疫苗免疫对CSFV、PRRSV、PRVgE、PCV2的疫苗免疫未产生明显影响； 综合试验结果发现：D组猪群生长状况最好，猪群平均增重最高、Mhp感染率低、产生较高水平的特异性抗体以及肺脏病变程度较小，说明采用丙公司猪支原体肺炎灭活苗加弱毒活苗混合免疫的效果最佳；其次效果较好的为丙公司弱毒活疫苗；乙公司的猪支原体肺炎灭活苗免疫效果较差；甲公司猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果最差。

目录

声明

符号及缩略词说明

1前言

1.1Mhp病原的基本形态以及理化特性

1.2Mhp的抗原性

1.3猪支原体肺炎致病机理

1. 4猪支原体肺炎的特征病变

1. 5诊断方法

1.6猪支原体肺炎疫苗

1.7研究目的及意义

2 试验材料

2.1主要试验试剂与耗材

2.2主要仪器设备及器材

2.3试验所用试剂配制方法

2.4 PCR检测引物序列及反应体系

2.5试验疫苗来源

3试验方法

3.1 试验猪分组及疫苗免疫

3.2 免疫猪群称重

3.3应激相关激素水平检测

3.4病原检测

3.5 ELISA抗体检测

3.6 肺脏病变评分

4 结果

4.1免疫猪群平均增重对比

4.2疫苗免疫后各组应激相关激素水平检测

4.3Mhp病原检测

4.4Mhp抗体水平检测

4.5肺脏病变评分

4.6呼吸道病原检测

4.7MPS疫苗免疫后对其他疫苗抗体水平的影响

5 讨论

5.1疫苗免疫产生的免疫应激对猪群的影响

5.2疫苗免疫与特异性抗体水平

5.3MPS疫苗免疫与呼吸道的病原感染

5.4MPS疫苗免疫与肺脏病变程度

5.5MPS疫苗免疫对平均增重的影响

5.6MPS疫苗免疫对其他疫苗免疫的影响

6 结论

参考文献

致谢

9 硕士期间发表论文情况