广枣总黄酮针对病毒性心肌炎的体外药效学研究

摘要

目的通过建立体外病毒性心肌炎(VMC)细胞模型，研究广枣总黄酮(TFCA)的体外抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)作用及其作用机制，探究其作用靶点，为TFCA进一步开发利用奠定基础。方法采用差速贴壁法培养原代乳鼠心肌细胞，镜下观察心肌细胞搏动次数，使用α-actin免疫组化法鉴定培养心肌细胞的纯度；在细胞水平测定阳性药盐酸胍以及广枣总黄酮的药物毒性；以CVB3感染心肌细胞建立病毒性心肌炎细胞模型；MTT染色分析广枣总黄酮对病毒感染后的Hela细胞及心肌细胞是否有保护作用；病毒繁殖抑制实验比较不同分组间TCID50的差别以验证广枣总黄酮在Hela细胞及心肌细胞上的抗病毒活性；测定各实验组心肌细胞培养上清液中心肌酶LDH、CK-MB的变化；测定各实验组心肌细胞培养上清液中肿瘤坏死因子TNF-α含量的变化；运用逆转录聚合酶链式反应测定心肌细胞内病毒相关基因的表达。结果经过在Hela细胞及心肌细胞水平的初筛，确定广枣总黄酮具有保护心肌细胞免受CVB3病毒侵袭的作用。病毒繁殖抑制实验显示广枣总黄酮的高、中剂量组TCID50与病毒对照组TCID50相差一个以上对数值；广枣总黄酮能使心肌酶(LDH、CK-MB)的释放较病毒组显著降低(P＜0.05)，还可抑制被病毒感染的心肌细胞TNF-α的分泌；同时，广枣总黄酮还可明显抑制CVB3相关基因c-Myc、TNF-α、Fas的表达。结论通过建立病毒性心肌炎细胞模型，证实广枣总黄酮在体外细胞培养物上具有抗CVB3病毒作用。

目录

0.前言

1.材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

5.附图

6.参考文献

文献综述蒙药广枣针对心血管系统疾病的药效学研究进展

缩略词表

攻读学位期间发表文章情况

个人简历

致谢