三种蓖麻病害病原菌分离鉴定及抗性药物筛选

摘要

本研究以通辽地区蓖麻叶斑病、根腐病、曲霉病三种病害作为研究对象，研究其形态特征及抗药性。在通辽市蓖麻种植区中，采集发病植株，分离出20株真菌（编号Ca1-Ca20）。经过致病性验证，结果表明：
　　Ca17菌株真菌能够让蓖麻植株发生病变。Ca17菌株在PDA培养基上初期颜色微黄发白，3d后从中间开始由白色变成墨绿色。分生孢子梗黑色，有三个或多个隔膜；Ca17接种在新鲜蓖麻植株进行致病性验证，3d后叶片上开始出现病斑，茎秆颜色变为淡黄色。5d后叶片病斑扩大，10d后整片叶子枯黄，茎秆病斑扩大茎秆变细。对Ca17 ITS1序列Blast比对结果表明其与弯孢菌菌株相似性达到93％。结合形态学与分子生物学鉴定结果表明Ca17为弯孢菌。
　　Ca18菌株真菌能够让蓖麻植株发生病变。Ca18菌株在PDA培养基上菌落生长十分迅速，48h就能长满85mm培养基，气生菌丝发达菌落疏松，呈无色至灰色。有发达的假根，灰黑色孢子囊，卵型或球形。ITS1序列比对结果表明，与米根霉菌株同源性达到99%。与文献中方水琴鉴定出桑树根腐病病原菌ITS扩增序列TY.GF1同源性达到100%。采用根部蘸菌发回接验证致病性，蘸菌后蓖麻植株逐渐萎蔫，叶片干枯。结合形态学和分子生物学鉴定表明Ca18为米根霉菌株。
　　Ca19菌株真菌能够让蓖麻植株发生病变。Ca19菌株在PDA培养基上初期为白色的气生菌丝，24h之后出现黑色分生孢子，菌落黑白相间。分生孢子头顶部梨形。ITS1序列Blast比对结果表明其与黑曲霉菌同源性达87%。接种在蓖麻植株上5d后接种部位茎秆开始腐烂，10d后植株接种部位以上萎蔫，腐烂面积扩大到叶柄，13d接种部位以上腐烂脱落。结合形态学和分子生物学鉴定结果表明Ca19为黑曲霉菌。
　　抗药性试验结果表明，百菌清和吗胍·乙酸铜在72h能100%抑制Ca17菌丝生长。春雷霉素抑制率达到91.4%。醚菌酯抑制率达到63.33%。氟哇唑对其抑制率达到70%。百菌清对Ca18菌丝抑制率达到100%，对春雷霉素抑制率达85%。吗胍·乙酸铜对Ca18抑制率达到66.25%。其他农药抑制率较低或没有效果。甲基托布津对Ca19菌丝抑制率达到76.66%，醚菌酯、异菌脲、井冈霉素、吗胍·乙酸铜对其抑制率在60%。
　　温度对菌丝生长影响试验表明，20℃-45℃Ca17菌株都能较好生长。Ca18菌株在20℃以上均能快速生长，在45℃生长较为缓慢。Ca19菌株在20-45℃能生长，37℃最适宜生长。所有菌株在10℃以下生长都受到抑制。

目录

缩略词表

第一章 文献综述

1 引言

1.1 蓖麻概述

1.2 蓖麻的应用价值

1.3 三种真菌病害研究进展

1.4 蓖麻病害的防治

1.5 病原菌检测技术

1.6 本研究的意义

第二章 蓖麻致病菌的分离鉴定

1.1 试验材料

1.2 仪器设备

2.1 病原菌分离方法

2.2 病原菌纯化方法

2.3 病原菌致病性检测

2.4 病原菌形态特征观察

2.5 病原菌的分子生物学鉴定

3 结果与分析

3.1 病原菌的分离纯化

3.2 致病性检测

3.3 病原菌的形态特征观察

3.4 病原菌的分子生物学鉴定

4 讨论

5 小结

1 试验材料及仪器设备

1.1 试验材料

1.2 仪器设备

2 试验方法

2.1 药剂试验方法

2.2 毒力回归方程

2.3 温度对菌丝生长影响试验方法

3 结果与分析

3.1 农药对菌丝生长的抑制情况

3.2 有效农药毒力回归方程

3.3 有效用药对病原菌的毒力回归方程

3.4 温度对菌丝生长的影响

4 讨论

4.1 农药对病原菌生长的影响

4.2 温度对菌丝生长的影响

5 小结

第四章 结论与讨论

1 病原菌分离鉴定

2 药剂敏感性及菌丝生长温度

参考文献

致谢

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附录