半枝莲甜菜红素提取物抗氧化及调血脂作用的研究

摘要

半枝莲（Portulaca grandiflora Hook）又名太阳花，是马齿苋科马齿苋属一年生肉质草本植物，在我国各地广泛栽培，是典型的合成甜菜素类植物。甜菜素（betalains）包括甜菜红素（betacyanin）和甜菜黄素（betaxanthin），甜菜红素主要以甜菜红色素糖苷的形式存在。本文利用溶解性质、薄层层析法和光谱扫描对半枝莲提取物中的红色素进行了初步的鉴定，采用高效液相色谱法进行了定量测定，用单因素和正交设计法优化出了半枝莲甜菜红素提取物的制备工艺条件；分别采用比色法、化学发光法和碘量法研究了半枝莲甜菜红素提取物体外清除自由基、抗血浆脂质过氧化和猪油氧化的能力；利用高脂饲料诱导大鼠高脂血症模型，研究了其调血脂及体内抗氧化作用。研究取得的结果与结论如下： 1．通过对半枝莲红色素的溶解性质观察、薄层色谱法和紫外可见波谱扫描分析推知，该红色素即为甜菜红素，但其结构类型需进一步确证。 2．采用正交设计法优化出半枝莲甜菜红素提取物制备的最佳工艺条件为：以半枝莲幼茎为材料，以双蒸水为溶剂，料液比1：10，提取温度45℃，pH值为7．0。在此条件下，半枝莲甜菜红素的提取率为7．44％。 3．半枝莲甜菜红素提取物具有较强的清除氧自由基（O2-·）、羟自由基（·OH）、二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）的能力，与对照维生素C（VC）比较，其清除自由基的能力强于VC；半枝莲甜菜红素提取物对血浆脂质过氧化的抑制效果也大于VC，且随浓度增加抑制作用增强；半枝莲甜菜红素提取物能有效地抑制猪油的氧化，但与同浓度（0．005mg/mL）的VC比较，差异不明显（P>0．05）。半枝莲甜菜红素提取物清除自由基与抗氧化能力与甜菜红素含量有关。 4．半枝莲甜菜红素提取物能显著降低高脂血症大鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白B（ApoB）含量，显著升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和载脂蛋白A（ApoA）含量，有调节血脂作用。半枝莲甜菜红素提取物还能显著降低动脉粥样硬化指数AI1和AI2，有预防和治疗动脉粥样硬化的作用。 5．半枝莲甜菜红素提取物能显著降低高脂血症大鼠血清及肝脏组织中丙二醛（MDA）含量，显著性提高血清及肝脏组织中的超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力，表明半枝莲甜菜红素提取物具有较强的体内抗氧化能力，其效果和烟酸肌醇酯相当。 结论：半枝莲甜菜红素提取物在体外具有很强的清除自由基、抗血浆脂质过氧化和猪油氧化的能力；能显著调节高脂血症大鼠的血脂，并降低动脉硬化指数，起到调节血脂的作用，同时减少大鼠血浆的脂质过氧化，提高血清及肝脏组织中的SOD和GSH-Px活力，具有较强的体内抗氧化能力。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:符号说明

声明

第一章文献综述

1自由基对生物大分子的损伤及其与疾病的关系

1.1自由基的种类

1.2 自由基对生物大分子的损伤

1.3 自由基与衰老、肿瘤、动脉粥样硬化等疾病的关系

1.4 自由基清除剂的防护作用

2天然抗氧化剂——甜菜红素

2.1 半枝莲

2.2甜菜红素的化学结构和光谱特性

2.3甜菜红素的稳定性及影响因素

2.4甜菜红素的提取与纯化方法

2.5甜菜红素的抗氧化作用

2.6甜菜红素的药理学作用

3本论文的创新点和研究的意义

4本论文主要研究内容

第二章半枝莲甜菜红素的提取及初步鉴定

1 材料

1.1 种子及培植条件

1.2试剂

1.3仪器

2方法和结果

2.1溶剂的选择

2.2色谱分析

2.3半枝莲甜菜红素提取条件的考察

3讨论

第三章半枝莲甜菜红素提取物体外抗氧化作用研究

1试药与仪器

1.1 试药

1.2仪器

2 实验方法

2.1 半枝莲甜菜红素提取物的制备

2.2甜菜红素的含量测定

2.3清除超氧阴离子自由基(O2-·)活性测定

2.4清除羟自由基(·OH)活性测定

2.5清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的测定

2.6 血浆脂蛋白氧化抑制能力的测定

2.7猪油氧化的抑制实验

3结果与分析

3.1半枝莲甜菜红素提取物清除O2-·的效果

3.2半枝莲甜菜红素提取物清除·OH的效果

3.3半枝莲甜菜红素提取物对DPPH·的抑制作用

3.4半枝莲甜菜红素提取物对血浆脂质过氧化的抑制作用

3.5半枝莲甜菜红素提取物对猪油氧化的抑制作用

4讨论

第四章半枝莲甜菜红素提取物调血脂及抗氧化作用

1 材料

1.1试剂盒和试剂

1.2仪器

1.3实验动物

1.4大鼠的饲料

2实验方法

2.1高脂血症模型的制备及动物分组

2.2动物饲养及处理

2.3 脂水平测定

2.4肝组织匀浆液的制备与组织中蛋白质的测定

2.5 血清和肝匀浆MDA测定

2.6 血清和肝匀浆SOD测定

2.7 血清和肝匀浆GSH-Px活力测定

2.8数据处理

3结果与分析

3.1各组大鼠体重变化

3.2建立高脂血症模型

3.3半枝莲甜菜红素提取物对实验大鼠血脂水平的影响

3.4半枝莲甜菜红素提取物在体内的抗氧化作用

4讨论

全文结论及展望

参考文献

攻读学位期间发表论文情况

致 谢