L-161982对实验性自身免疫性神经炎大鼠趋化因子表达的影响

摘要

研究目的:
　　吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barresyndrome，GBS)是以周围神经髓鞘脱失和小血管炎性细胞浸润为病理特点的自身免疫性周围神经病，以肢体对称性弛缓性瘫痪为主要临床特征。实验性自身免疫性神经炎(experimentalautoimmuneneuritis，EAN)是国际公认的研究GBS的动物模型，是T辅助细胞1和T辅助细胞17(Th1/Th17)介导的自身免疫性疾病，以周围神经脱髓鞘和大量炎性细胞浸润为主要病理特点。这些浸润的炎性细胞主要包括单核巨噬细胞、淋巴细胞以及粒细胞，促炎性细胞因子如IFN-γ、TNF-α、NO及趋化因子MCP-1、MIP-1等在其发病中起关键作用。
　　近年来研究认为前列腺素E2(ProstaglandinE2)是一种免疫激活剂，可能通过作用于EP4受体影响Th1和Th17这两个细胞亚群的分化来参与自身免疫性疾病的免疫炎症过程，由此我们推测PGE2-EP4受体拮抗剂对EAN具有治疗作用。在我们的前期研究中发现，应用PGE2-EP4拮抗剂L-161982干预EAN大鼠，可降低其坐骨神经中促炎性细胞因子IL-17及IFN-γ的表达。基于趋化因子在GBS/EAN中的重要作用，本实验观察了PGE2-EP4拮抗剂L-161982对EAN大鼠趋化因子CXCL-12和MCP-1表达的影响。
　　实验方法:
　　1.用周围神经鞘磷脂(BPM)免疫Lewis大鼠，制备EAN模型。
　　2.随机将21只EAN大鼠分为3组，治疗A组、治疗B组和对照组。两个治疗组均以剂量为5mg/kg的PGE2-EP4受体拮抗剂L-161982腹腔注射治疗。治疗A组于免疫阶段（免疫前1天至免疫后第8天）每日行L-161982处理，治疗B组于发病阶段（免疫后第5天至第14天）每日行L-161982处理。对照组在整个实验阶段每日给予相同体积的L-161982溶媒DMSO腹腔注射。
　　3.免疫后每日观察EAN大鼠的临床评分。于免疫后第15天处死EAN大鼠，取其坐骨神经，用免疫组化法检测坐骨神经中趋化因子CXCL-12及MCP-1的表达水平。
　　4.应用SPSS18.0软件对资料进行统计分析，数据以(x)±s表示。
　　实验结果:
　　1.与对照组相比，不同阶段处理的两个治疗组均能延迟EAN的发病时间(P＜0.05)，降低其高峰期临床评分(P＜0.05)，减少坐骨神经中CXCL-12和MCP-1的表达(P＜0.05)。
　　2.两个治疗组间发病时间、高峰期临床评分以及趋化因子表达的比较，均可见显著差异(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.应用L-161982治疗可明显延迟EAN大鼠的发病时间，降低其高峰期临床评分，改善EAN大鼠的临床症状，说明其对周围神经自身免疫性疾病有治疗作用。
　　2.应用L-161982治疗可抑制EAN大鼠坐骨神经中趋化因子CXCL-12及MCP-1的表达，提示PGE2-EP4受体拮抗剂L-161982可通过抑制巨噬细胞和T细胞的迁移活化，减少CXCL-12和MCP-1的产生，从而抑制免疫炎症反应，这可能是L-161982的抗炎机制之一。
　　3.与发病阶段相比，免疫阶段应用PGE2-EP4受体拮抗剂L-161982更能显著延迟EAN大鼠的发病时间，降低其高峰期评分，减少坐骨神经中趋化因子CXCL-12和MCP-1的表达。因此，免疫阶段使用L-161982治疗效果更显著。