血清MIF、CKLF1及FKN水平与急性缺血性脑卒中的相关性及临床意义研究

摘要

目的：
　　脑卒中是我国排名第二位的致死疾病以及最主要的致残疾病，常常导致患者严重的运动能力缺失，生活质量严重下降。脑卒中导致的神经功能缺损不仅给患者身体和精神上带来了巨大的痛苦，也给家庭其他成员以及社会带来了沉重的经济负担。在我国，急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke，AIS)约占全部脑卒中的80％。深入的了解AIS的发病机制、AIS后的病理生理过程，有助于找到AIS新的治疗靶点以及制定新的治疗策略。
　　AIS的发病机制及AIS发生后的病理生理过程十分复杂。包括趋化因子在内的众多细胞因子在AIS发生、发展及恢复过程中都发挥了重要的作用。
　　巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor，MIF)是进化过程中的一个保守蛋白质，分子量约12kDa。MIF不仅是先天免疫的重要调节因子，还参与了多种炎性疾病的病理生理过程。近年来，MIF在AIS中扮演的角色逐渐引起了人们的关注。然而，MIF在AIS中到底是起保护作用还是损伤作用还有争论。MIF与AIS患者临床特征的相关性及临床意义并未完全明确。
　　趋化素样因子1(chemokine-like factor1，CKLF1)属于趋化素样超家族。一系列动物实验显示CKLF1在AIS中具有重要的作用。基础研究中CKLF1在AIS中表现为一个损伤因素。然而AIS患者血液中CKLF1水平是否升高？CKLF1水平的变化是否与AIS患者的临床特征具有一定的相关性？这些问题都需要进行大量的相关临床研究来回答。
　　不规则趋化因子(Fractalkine，FKN)是CX3C类趋化因子中唯一成员。FKN在多种疾病中，包括动脉粥样硬化、脉管炎、类风湿关节炎等发挥重要作用。近年来，有研究对FKN在AIS中的作用进行探索。目前，FKN在中国患者与AIS的相关性未见报道。FKN与AIS患者临床特征之间的关系也不明确。
　　已有的研究显示MIF、CKLF1及FKN在AIS中具有重要的作用。然而，相关的临床研究并不充分。本研究将重点探索MIF、CKLF1及FKN与AIS临床特征的相关性及这些细胞因子在AIS中的临床意义。
　　方法：
　　1、病例资料
　　收集2014年12月至2015年9月在山东大学附属济南市中心医院神经内科住院被诊断为AIS患者的病例资料329例，符合全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准，且排除入院时合并发热，感染，肿瘤，风湿类疾病的患者。本研究排除了102例症状发作24小时后的患者、72例AIS复发的患者及9例关键临床数据不完善的患者。最终共计146例AIS患者被纳入本研究。同时选取在健康查体中心查体的无脑血管病史的45例查体者作为对照组，匹配年龄和性别。记录AIS患者及健康对照人群与心脑血管疾病风险有关的基本信息，完善心脑血管疾病风险相关的其它实验室检查结果并记录。
　　2、按照试剂的实验方案用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的方法对AIS患者发病24小时内及3月后随访时的血清MIF、CKLF1、FKN水平进行检测，同时检测对照组血清MIF、CKLF1、FKN水平。
　　3、病灶的影像学评估、患者临床预后的评估及随访
　　颅脑MRI检查在AIS患者入院内24小时完成。梗死灶体积V=0.5×a×b×c。a为病灶的最大纵径，b为病灶的垂直于a的最大横径，c为包含梗死灶的10mm扫描层面的数目。患者临床预后的评估采用mRS评分(modified RankingScale)标准。3个月时，患者mRS0-2分定义为预后良好，而mRS3-6分定义为预后不良。随访时间为AIS发病后3个月。随访的内容包括患者神经功能缺损恢复情况，进行mRS评分。随访方式为门诊随访。
　　4、统计学分析
　　本研究测定的连续变量数值用均数±标准差((x)±s)表示，采用t检验分析;不同组间数值的比较采用Mann-Whitney U检验以及卡方检验;相关性分析采用斯皮尔曼等级相关分析;采用Logistic回归进行多因素分析;采用IBM SPSS20统计软件进行数据分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。绘图采用GraphPadPrism5软件。
　　结果：
　　1、AIS患者的基本资料及实验室检查结果
　　本研究共纳入了146例AIS患者及45例健康对照组。AIS患者组和对照组相比较，年龄、性别、吸烟史等没有显著差异。AIS患者组高血压、糖尿病和高血脂症的患病比例要显著高于对照组。
　　2、MIF的相关结果
　　1) AIS患者24小时内血清MIF水平为1.230ng/ml，而对照组平均血清MIF水平为0.876ng/ml，两组之间有显著差异(P＜0.0001);在各个亚型AIS患者中，MIF水平都高于对照组;AIS患者慢性期的血清MIF水平明显下降，低于急性期的血清MIF水平(P＜0.001)，且与对照组无明显差别(P=0.392)。
　　2)斯皮尔曼等级相关分析结果显示24小时内血清MIF水平与梗死灶体积呈正相关(r=0.5515，P＜0.0001);24小时内血清MIF水平与NIHSS评分也呈正相关(r=0.5190,P＜0.0001)。
　　3)预后不良组患者的血清MIF水平显著高于预后良好组;多因素分析结果显示，血清MIF水平升高为AIS预后不良的一个独立预测因素，OR值为1.113(P=0.005,95％ CI:1.051-1.238)。
　　4)血清MIF水平在AIS预测及诊断中的价值研究中，多因素分析结果显示血清MIF水平是AIS的一个独立预测因素，OR值为1.985(95％ CI，1.672-2.252，P=0.011);我们采用受试者工作特征曲线来评估血清MIF水平诊断AIS的价值。血清MIF水平的最佳截断值为0.821ng/ml，相对应的敏感性为74.7％，特异性为66.7％，曲线下面积为0.717(95％ CI，0.638-0.796)。血清MIF水平在AIS诊断中展现出中等的辨别能力。
　　3、CKLF1的相关结果
　　1)AIS患者组平均血清CKLF1水平为37.730pg/ml，而正常对照组平均血清CKLF1水平为31.884pg/ml。AIS患者组的血清CKLF1水平显著高于对照组(P＜0.0001)。每个亚型患者的血清CKLF1水平都要高于对照组;AIS患者发病3个月时血清CKLF1水平明显下降，低于急性期的血清CKLF1水平(P＜0.001)。而与对照组无明显差别。
　　2)斯皮尔曼等级相关分析结果显示24小时内血清CKLF1水平与梗死灶体积无明显相关(r=0.1417，P=0.0879);24小时内血清CKLF1水平与NIHSS评分也无明显相关性(r=0.1230，P=0.1391)。
　　3)预后不良组患者的血清CKLF1水平显著高于预后良好组(P=0.005)。
　　4、FKN的相关结果
　　1) AIS患者组平均血清FKN水平为106.043pg/ml，而对照组平均血清FKN水平为80.621pg/ml，AIS患者组的血清FKN水平显著高于对照组(Z=8.821，P＜0.0001)。每个亚型患者的血清FKN水平都要高于对照组。AIS患者慢性期的血清FKN水平明显下降，低于急性期的FKN血清水平(P＜0.001)。仍然明显高于正常对照组的血清FKN水平(P＜0.001)。
　　2)斯皮尔曼等级相关分析结果显示24小时内血清FKN水平与梗死灶体积无明显相关(r=0.05947，P=0.4758);24小时内血清FKN水平与NIHSS评分也无明显相关性(r=0.06708，P=0.4211)。
　　3)预后不良组患者的24小时内血清FKN水平与预后良好组患者的FKN水平无显著差别(P=0.868)。而3个月时，预后不良组患者的血清FKN水平显著低于预后良好组患者(P＜0.001)
　　结论：
　　1、首次发现24小时内血清MIF水平与AIS患者梗死灶体积、NIHSS评分呈正相关;24小时内血清MIF水平可以作为AIS患者的一个预后指标。
　　2、首次发现AIS患者24小时内血清CKLF1水平上升。
　　3、首次在中国人中证实AIS患者24小时内血清FKN水平显著上升;首次发现AIS患者3个月时血清FKN水平仍高于正常水平，且预后不良组患者的血清FKN水平显著低于预后良好组患者。提示外源性FKN可能是AIS的潜在的治疗手段。

目录

声明

摘要

缩略语说明

前言

病例资料及方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 趋化因子与缺血性脑卒中

致谢

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