抗血管内皮生长因子药物抑制角膜新生血管生长的实验研究

摘要

目的:研究抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)药物在动物模型与临床患者中对角膜新生血管(corneal neovascularization，CNV)生长的抑制作用。
　　方法:选用新西兰大白兔30只，使用缝线法诱导CNV，随机分成6组，每组5只。1组、2组、3组分别于缝线后1w结膜下注射0.05ml抗VEGF药物、基质内注射0.05ml抗VEGF药物、结膜下注射0.05ml生理盐水14组、5组、6组分别于缝线后2w结膜下注射0.05ml抗VEGF药物、基质内注射0.05ml抗VEGF药物、结膜下注射0.05ml生理盐水。裂隙灯显微镜观察并记录CNV的生长变化，图像处理软件测量CNV的长度、面积和管径。每组注射前和注射后1、2、3w各随机处死一只实验兔，抽取房水采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedimmunosorbent assay, ELISA)测量VEGF蛋白浓度，取角膜行苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining，HE染色）观察病理变化。
　　前瞻性观察不同原因所致CNV的患者共6例6眼，随访3-12月。所有患者根据病变范围及深度分象限结膜下及基质层注射抗VEGF药物共0.2ml。随访期间行视力、眼压及裂隙灯检查，观察并记录患者的视力、眼压，CNV的长度、面积、管径等指标，根据新生血管的形态及各指标的变化评价治疗效果。
　　结果:1组与3组比较，1组注射后1w、2w CNV长度、面积、管径均小于3组，有统计学意义，注射后3w长度无统计学差异。2组注射后1w CNV各指标均小于3组，有统计学意义，与1组比较各指标无统计学差异，注射后2w、3wCNV各指标明显小于3组和1组，差异有统计学意义。4组与6组比较，注射后4天、1w、2w、3w4组CNV管径、面积明显小于6组，差异有统计学意义，长度无统计学差异。5组与6组比较，注射后4天CNV长度无统计学差异，5组面积、管径明显小于6组，差异有统计学意义，注射后1w、2w、3w CNV各指标均明显小于6组，差异有统计学意义。5组与4组比较，注射后4天各指标均无统计学差异;注射后1w长度无统计学差异，5组面积、管径明显小于4组，差异有统计学意义;注射后2w、3w5组CNV各指标均小于4组，差异有统计学意义。
　　ELISA示1组在注射后1w VEGF浓度降至最低，与注射前相比有统计学差异，注射后2w、3w VEGF浓度有明显增加，与注射后1w相比统计学差异，但均明显低于同时期3组浓度;2组注射后1w VEGF浓度与注射前相比有统计学差异，与1组注射后1w相比无统计学差异，注射后1w、2w、3w VEGF浓度均明显小于注射前以及同时期3组，2组注射后2w、3w VEGF蛋白浓度均明显小于同时期1组。4组注射后注射后3w与注射前及6组同时期相比均无统计学差异。
　　6例患者结膜下及基质内注射抗VEGF药物后1w，CNV变短、管径变细、面积减小，部分细小血管消失;睫状充血和角膜水肿减轻，视力得到不同程度的改善。注射后随时间推移，CNV再生，血管长度变长、面积变大、管径变粗。4例患者行多次注射，每次注射后均出现CNV变短、管腔变细，角膜水肿和浑浊减轻，注射后随着时间推移新生血管再次生长。每次注射后1w、2w、3w患者CNV面积、管径下降比例均有统计学意义，注射后1w、3w长度下降比例无统计学意义。注射后4w CNV管径下降比例有统计学意义，长度和面积下降比例无统计学意义。2例患者于抗VEGF药物注射后行角膜移植术，术后植片清晰，愈合好。
　　结论:结膜下及基质内注射抗VEGF药物可抑制CNV的生长，主要表现在CNV管径的缩小。角膜基质内注射的抑制效果优于结膜下注射，早期注射的效果优于晚期。重复用药可维持其作用，为进行下一步的治疗创造有利条件。

目录

声明

摘要

研究背景

动物实验部分

1．实验材料

2．实验方法

3 实验结果

1．患者资料

2 试验材料与方法

3．结果

讨论

结论与展望

参考文献

致谢