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邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对斑马鱼(Danio rerio)的毒性作用机制探究

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摘要

第一章绪论

1.邻苯二甲酸酯概述

1.1简介及理化性质

1.2用途、来源和污染现状

2.邻苯二甲酸二甲酯概述

2.1简介及理化性质

2.2邻苯二甲酸二甲酯的代谢

3.邻苯二甲酸酯的毒性作用研究进展

3.1邻苯二甲酸酯的环境内分泌干扰物效应

3.2邻苯二甲酸二甲酯的毒性作用研究进展

3.3内分泌干扰物研究中的生物标志物

4.2斑马鱼作为生物模型的优势

4.3斑马鱼在环境污染物和内分泌干扰物研究中的应用

5.研究内容和研究意义

5.1研究内容

5.2研究意义及创新点

第二章DMP急性毒性暴露对斑马鱼抗氧化系统的毒性作用

1.实验材料与器具

1.1材料

1.2主要仪器与设备

2.试验方法

2.1半致死浓度(LC50)的测定

2.2急性毒性暴露试验

2.3超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽转移酶(GST)活力测定

2.4丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量测定

2.5非变性电泳(Native-PAGE)

2.6总RNA提取和cDNA的合成

2.7实时荧光定量(Real-time)PCR

3.实验结果

3.1半致死浓度(LC50)

3.2超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽转移酶(GST)活力

3.3丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量

3.4 SOD酶非变性电泳结果

3.5总RNA提取电泳检测、内参基因PCR扩增电泳检测和引物PCR检测结果

3.6氧化应激相关基因实时荧光定量(Real-time)PCR结果

4.讨论

5.小结

第三章DMP急性毒性暴露对斑马鱼能量代谢和免疫反应的毒性作用

1.实验材料与器具

1.1材料

1.2主要仪器与设备

2.1苹果酸脱氢酶(MDH)与乳酸脱氢酶(LDH)非变性电泳检测

2.2斑马鱼肌肉和粘液总RNA的提取和cDNA的合成

3.2能量代谢和免疫相关基因实时荧光定量(Real-time)PCR检测结果

4.讨论

5.小结

第四章DMP长期暴露下对斑马鱼生长发育的毒性作用

1.实验材料与器具

1.1材料

1.2主要仪器与设备

2.试验方法

2.1长期暴露试验过程中的斑马鱼体重测定

2.2总RNA的提取和cDNA的合成

2.3实时荧光定量(Realtime)PCR

3.实验结果

3.1长期暴露试验下斑马鱼幼鱼的体重变化

3.2生长发育相关基因RT-PCR结果

4.讨论

5.小结

第五章总结与展望

1.总结

2.不足与展望

附录

致谢

参考文献

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