前言
1 文献综述
1.1 聚羟基脂肪酸酯概述
1.1.1 聚羟基脂肪酸酯简介
1.1.2 聚羟基脂肪酸酯的生物合成
1.1.3 聚羟基脂肪酸酯的性质
1.1.4 聚羟基脂肪酸酯的生产
1.2 P(3HB-co-3HP)概述
1.2.1 聚3-羟基丁酸简介
1.2.2 聚3-羟基丁酸的合成方法
1.2.3 聚3-羟基丙酸简介
1.2.4 聚3-羟基丙酸的合成方法
1.2.5 P(3HB-co-3HP)简介
1.3 P(3HB-co-3HP)的合成方法
1.3.1 结构相关单体的使用
1.3.2 甘油途径
1.3.3 丙二酸单酰辅酶A途径
1.4 P(3HB-co-3HP)提取方法
1.4.1 有机溶剂提取法
1.4.2 表面活性剂-络合剂水溶液提取法
1.4.3 氯仿-次氯酸钠提取法
1.4.4 酶法提取
1.5 PHA国内研究进展
1.6 PHA的应用
1.6.1 医疗领域
1.6.2 塑料工业领域
1.7 真养产碱杆菌H16简介
1.8 丙酰辅酶 A 转移酶、丙二酸单酰辅酶 A 还原酶、甘油激酶、已酰辅酶A羧化酶简介
1.8.2 丙二酸单酰辅酶A还原酶(mcr)
1.8.3甘油激酶(glpk)
1.8.4 已酰辅酶A羧化酶（accADBC）
1.9 接合转移技术简介
1.10 本课题研究方案与研究意义
1.10.1本课题研究意义
1.10.2 本课题研究方案
2 产P(3HB-co-3HP)工程菌的构建
2.1 引言
2.2 实验材料与仪器
2.2.1 菌株和质粒
2.2.2 引物
2.2.3 试剂与器材
2.2.4 溶液的配制
2.3 实验内容
2.3.1 构建载体pSMART-LCKan-Para-pct
2.3.2 构建载体pSMART-LCKan-Para-mcr
2.3.3 构建载体pSMART-LCKan-Para-accADBC
2.3.4 构建pBBR1-pct
2.3.5 构建pBBR1-pct-mcr
2.3.6 构建pBBR1-pct-mcr-accADBC
2.3.7真养产碱杆菌高表达系统的研究
2.3.8 真养产碱杆菌H16摇瓶发酵
2.3.9 PHB的提取分离
2.3.10 高产P(3HB-co-3HP)的摇瓶发酵
2.4 结果与讨论
2.4.1 pSMART-LCKan-Para-pct的构建
2.4.2 pSMART-LCKan-Para-mcr的构建
2.4.3 pSMART-LCKan-Para-accADBC的构建
2.4.4 pBBR1-pct的构建
2.4.5 pBBR1-pct-mcr的构建
2.4.6 pBBR1-pct-mcr-accADBC的构建
2.4.7 真养产碱杆菌高表达系统的构建
2.4.8 真养产碱杆菌H16的发酵
2.4.9 真养产碱杆菌H16工程菌的发酵
2.5 本章小结
3 诱导剂浓度对真养产碱杆菌工程菌的影响
3.1 引言
3.2 实验材料与仪器
3.2.1 菌株和质粒
3.2.2 主要仪器
3.2.3 实验试剂
3.3 实验内容
3.3.1 真养产碱杆菌工程菌的构建
3.3.2 真养产碱杆菌工程菌的发酵
3.3.3 P(3HB-co-3HP)的分离与分析
3.4 结果与讨论
3.4.1 诱导剂浓度对真养产碱杆菌工程菌生长情况的影响
3.4.2 诱导剂浓度对产物的影响
3.4.3 诱导剂浓度对产物中各部分产含量的影响
3.5 本章小结
4 甘油激酶对真养产碱杆菌H16甘油利用率的影响
4.1 引言
4.2 实验材料与仪器
4.2.1 菌株和质粒
4.2.2 主要仪器
4.2.3 引物
4.2.4 实验试剂
4.3 实验内容
4.3.1 构建载体pEF-BR42-TI-glpk
4.3.2 真养产碱杆菌工程菌的发酵
4.3.3 结果讨论
4.4 本章小结
5 甘油激酶对真养产碱杆菌工程菌油脂利用率的影响
5.1 引言
5.2 实验材料与仪器
5.2.1 菌株和质粒
5.2.2 主要仪器
5.2.3 实验试剂
5.2.4 引物
5.3 实验内容
5.3.1 构建载体pBBR-pct-mcr-accADBC-glpk
5.4 结果与讨论
5.4.1 扩增扩增pBBR-pct-mcr-accADBC序列
5.4.2 扩增扩增glpk序列
5.4.3 载体连接
5.5 本章小结
结论
参考文献
致谢
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