冷冻干燥法保存精子超微结构的研究

摘要

目的：研究冷冻干燥法保存人类精子前后超微结构的变化。 方法：取健康志愿者合格精液50份，平均分为5组，其中3组分别加入不同的冻干保护剂(ETBS；ETBS+海藻糖；ETBS+海藻糖+蛋黄)后给予冷冻干燥处理，在4℃冰箱中保存3周；第4组经液氮程序降温法冷冻保存4周；第5组作为新鲜精液对照组。冷冻干燥组、液氮组复水后和对照组在扫描电镜下观察超微结构。 结果: ETBS、ETBS+海藻糖、ETBS+海藻糖+蛋黄组，液氮冷冻组和新鲜对照组中正常精子比例分别为(46.39±1.46)％、(55.75±1.29)％、(67.20±1.8)％、(63.16±2.63)％、(85.94±1.86)％。对照组精子活动率为70.71％±7.5％，ETBS组为21.74％±3.2％，ETBS+海藻糖为32.15％±5.19％，ETBS+海藻糖+蛋黄组为40.52％±2.86％，液氮冷冻组为35.12％±4:37％。后四组与对照组差异有显著性P<0.05，冻干A、C二组间差异有显著性P<0.05。 结论: 加入保护剂ETBS+海藻糖+蛋黄的精子经冷冻干燥保存后，超微结构损伤较其他组均轻。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一章冷冻干燥技术简介

1.1冷冻干燥研究简介

1.2冷冻干燥样本制备

1.3精子冷冻干燥研究进展

第二章冷冻干燥精子的制备

2.1材料与方法

2.2人精子的获取和预处理

2.3冻干保护剂的配制

2.4冻干保护剂的添加

2.5人精子的冷冻干燥

2.6冷冻干燥样品的复水及保护剂的洗涤

2.7液氮程序降温冷冻

2.8液氮冷冻组解冻

第三章冷冻干燥精子的观察

3.1光学显微镜观察

3.2电镜标本制备

3.3观察内容

3.4数据资料的统计处理

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述精子冷冻保存

攻读学位期间的研究成果

致谢