Notch受体阻断剂MW167诱导U87胶质瘤细胞凋亡的作用研究

摘要

目的：探讨Notch受体阻断剂MW167对胶质瘤细胞系U87增殖及凋亡的影响，并初步探讨其机制，为其能否应用于胶质瘤的临床治疗提供理论依据。 方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测MW167对体外培养的胶质瘤细胞系U87的增殖抑制作用，流式细胞仪AnnexinV-FITC和PI双染检测凋亡率，流式细胞仪检测靶蛋白Hes-1和抗凋亡蛋白bcl-2的表达变化，RT-PCR检测靶基因Hes-1 mRNA的表达。 结果：MTT法检测显示MW167明显抑制U87细胞的增殖(P<0.05)并呈浓度依赖性反应；流式细胞仪检测显示MW167可诱导U87胶质瘤细胞发生凋亡(P<0.05)且呈浓度依赖关系：流式细胞仪检测显示MW167可显著下调靶蛋白Hes-1和抗凋亡蛋白bcl-2的表达(P<0.05)且呈浓度依依赖关系；RT-PCR检测显示MW167可显著下调靶基因Hes-1 mRNA的表达(P<0.05)。 结论：MW167通过对Notch信号系统的调节明显抑制了U87胶质瘤细胞的增殖并诱导其发生凋亡，提示Notch受体阻断剂MW167对人脑胶质瘤的治疗可能具有潜在的临床应用价值。

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文摘

英文文摘

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引言

第一章材料与方法

1.1材料

1.1.1主要仪器及一次性用品

1.1.2主要试剂

1.1.3主要液体的配制

1.1.4引物

1.2实验方法

1.2.1人胶质瘤细胞U87的传代培养

1.2.2 U87细胞毒试验(MTT法)

1.2.3 U87细胞凋亡率检测

1.2.4流式细胞仪检测Hes-1和bcl-2的表达

1.2.5RT-PCR检测Hes-1mRNA的表达

1.2.6统计分析

第二章结果

2.1U87的胶质瘤细胞的培养

2.2MW167对U87细胞增值的影响

2.3MW167对U87细胞凋亡的影响

2.4流式细胞仪检测Hes-1和bcl-2蛋白的表达

2.5RT-PCR检测Hes-1mRNA的表达

第三章讨论

第四章结论

参考文献

文献综述 Notch信号通路在神经胶质瘤中的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢