应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究

摘要

目的：探讨犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)细胞片层在构建组织工程骨中的作用。
　　 方法：制备犬同种异体脱钙骨基质(dermineralized bone matrix，DBM)。将人重组骨形态发生蛋白-2(recombination human bone morphogenetic protein-2，rhBMP-2)复合到DBM上。抽取犬髂骨骨髓，采用密度梯度离心法分离犬骨髓基质细胞(BMSCs)，将其向成骨细胞诱导分化。将经成骨诱导的第3代细胞接种于温度反应性培养皿中培养，至细胞增殖并互相融合时，将培养箱温度降至20℃，制备完整的BMSCs细胞片层，将其包裹DBM/rhBMP-2/BMSCs复合体植入犬左侧背阔肌下包裹胸背动静脉束为实验侧，以无BMSCs细胞片层包裹的DBM/rhBMP-2/BMSCs复合体植入犬右侧背阔肌下包裹胸背动静脉束为对照侧。术后8、12、16周取材行大体观察、影像学观察及组织学观察，评价成骨情况。采用SPSS18.0统计软件对数据进行两样本均数差别的t检验。
　　 结果：
　　 1.制备的BMSCs细胞片层完整致密，在支架复合体表面生长良好。
　　 2.成骨面积实验侧>对照侧，两者之间差异有显著性(P<0.05)。术后16周，实验有大量板层骨形成，有哈弗氏系统形成，骨髓腔内有红骨髓；对照侧有板层骨形成，无哈弗氏系统形成，骨髓腔内无红骨髓。
　　 结论：BMSCs细胞片层可促进具有致密板层骨和哈弗氏系统的组织工程骨的形成。