亚抑菌浓度抗生素对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

摘要

目的：研究四种抗生素在不同亚抑菌浓度下对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响。
　　 方法：分别在MHB和LB培养基中应用微量稀释法测定铜绿假单胞菌PA01对阿奇霉素、环丙沙星、阿米卡星和头孢他啶的MIC值；按倍比稀释的方法将四种抗生素稀释至不同亚抑菌浓度，将铜绿假单胞菌在上述浓度中用96孔板静态造膜；将铜绿假单胞菌在MHB培养基中加入阿奇霉素终浓度为256mg/l，8mg/l和空白时分别用试管和医用硅胶片造膜。
　　 结果：①阿奇霉素在MHB和LB中MIC分别为16mg/l和512mg/l。头孢他啶，环丙沙星和阿米卡星的MIC在两种培养基中均为4mg/l、0.125mg/l和4mg/l。②静态造膜结果：在MHB中，阿奇霉素浓度≥16mg/l时能抑制生物膜的形成，而在浓度≤8mg/l时促进生物膜的形成；在LB培养基中，阿奇霉素浓度为4-256mg/l时均促进铜绿假单胞菌生物膜形成。亚抑菌浓度的头孢他啶和环丙沙星在MHB和LB培养基中均抑制生物膜形成；阿米卡星在MH8培养基中浓度为0.125mg/l时促进生物膜形成，在LB培养基中为0.25mg/l时，促进生物膜形成。以上结果与对照组比较差别均有统计学意义。另外，在铜绿假单胞菌静态造膜开始时即加入群体感应系统分子抑制剂-呋喃酮C-30(50umol/l)，24h对生物膜形成无影响，差别无统计学意义。③银染色结果显示：在MHB培养基中培养时，阿奇霉素浓度为8mg/l时生物膜形成最多，其次是空白组，阿奇霉素浓度为256mg/l时最少。
　　 结论：不同培养条件下铜绿假单胞菌浮游菌对阿奇霉素的敏感性不同；亚抑菌浓度的阿奇霉素能促进铜绿假单胞菌生物膜形成。亚抑菌浓度的环丙沙星、头孢他啶和阿米卡星对生物膜的影响与浓度和培养条件密切相关。