Smad4、S100B在孕期不同阶段铅暴露大鼠胎盘及仔鼠脑组织中的表达及意义

摘要

目的:观察孕期不同阶段铅暴露对大鼠胎盘及仔鼠脑组织中Smad4、S100B表达的影响，进一步探讨铅致胎盘及脑组织损伤的机制。
　　 方法:Wistar大鼠108只随机分为4组，雌性比例:2∶1，合笼喂养。于孕期不同阶段给予0.25g/L醋酸铅溶液饮服。统计不同妊娠结局，电子分析天平称量胎盘重量。石墨炉原子吸收分光光度法测定大鼠血铅及仔鼠脑铅水平。免疫组织化学法测定各组大鼠胎盘中Smad4以及S100B蛋白的表达。仔鼠脑组织中S100B蛋白的表达采用双抗体夹心酶联免疫法。多组间比较采用方差齐性检验和单因素方差分析(One Way ANOVA);进一步进行组间两两比较时，若方差齐时，采用SNK(Student-Newman-Keuls法)检验;若方差不齐时采用Games-Howe(l)(l)检验。率间比较采用x2检验。
　　 结果:①剔除自然分娩与异常妊娠结局大鼠，最终入组大鼠分别为:孕早期铅暴露组16只，孕晚期铅暴露组15只，孕全期铅暴露组15只，对照组17只，受孕大鼠异常妊娠率间比较，差异无统计学意义。②大鼠孕末期血铅及仔鼠脑铅水平由高至低依次为孕全期铅暴露组＞孕早期铅暴露组＞孕晚期铅暴露组＞对照组。胎盘重量由高至低依次为:对照组＞孕晚期铅暴露组＞孕前期铅暴露组＞孕全期铅暴露组。任意两组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。大鼠胎盘重量与孕末期血铅水平呈显著负相关(r=-0.652，P＜0.01)③Smad4主要表达于大鼠胎盘绒毛滋养细胞、毛细血管及间质细胞，与对照组比较，各染铅组大鼠胎盘中Smad4表达均升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。与孕早期铅暴露组比较，孕晚期及孕全期铅暴露组大鼠胎盘中Smad4表达均下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。④S100B蛋白在大鼠胎盘中主要表达与滋养层细胞、蜕膜细胞及血管壁细胞胞浆中，铅暴露组阳性表达率高于对照组(52.94％)，且孕全期铅暴露组(93.33％)高于孕早期(87.50％)及孕晚期铅暴露组(80.00％)，差异有统计学意义(x2=18.62，P＜0.05)。⑤与对照组比较，孕期染铅组子代仔鼠脑组织中S100B的表达均升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。与孕全程染铅组比较，孕早期及孕晚期染铅组子代仔鼠脑组织中S100B表达均下降，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论:孕期铅暴露使得大鼠胎盘中Smad4、S100B及子代仔鼠脑组织中S100B的表达均升高，且与铅水平密切相关。孕期低水平铅暴露导致大鼠胎盘中Smad4、S100B及子代仔鼠脑组织中S100B表达的异常，可能在铅介导的胎盘及脑组织损伤中起重要作用。

目录

摘要

引言

第1章 材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 实验仪器

1．1．2 实验试剂

1．1．3 实验动物

1．2 实验方法

1．2．1 实验动物分组及染毒方法

1．2．2 胎盘称重及妊娠结局统计

1．2．3 取材及标本制备

1．2．4 血铅及仔鼠脑铅测定

1．2．5 Smad4免疫组化-SP法染色

1．2．6 S100B免疫组化-SP法染色

1．2．7 脑组织匀浆的制备

1．2．8 蛋白定量BCA法测定匀浆蛋白浓度

1．2．9 大鼠S100B蛋白酶联免疫分析

1．3 统计学处理

第2章 结果

2．1 不同孕期铅暴露大鼠妊娠结局统计

2．2 孕末期大鼠血铅水平和胎盘重量

2．3 大鼠胎盘中Smad4表达的测定结果

2．4 S100B蛋白在孕末期胎盘中的表达

2．5 仔鼠脑组织中铅含量测定结果

2．6 子代仔鼠脑组织中S100B表达的测定结果

第3章 讨论

3．1 孕期铅暴露水平与异常妊娠率

3．2 血铅水平对大鼠胎盘组织的影响

3．3 Smad4在铅致胎盘损伤中的作用

3．3．1 低水平铅暴露对胎盘组织中Smad4表达的影响

3．3．2 胎盘组织中Smad4的表达及其意义

3．4 S100B在铅致胎盘损伤中的作用

3．5 铅的神经毒性

3．6 S100B蛋白在铅致仔鼠脑组织损伤中作用

3．6．1 仔鼠脑组织中S100B的表达机制

3．6．2 S100B蛋白在不同孕期铅暴露下仔鼠脑组织中的表达特点及意义

结论

附图

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

致谢

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